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在BOD测定过程中,葡萄糖作为常见的碳源补充物质,其用量对测定结果的准确性有直接影响。以下从多个方面分析葡萄糖用量的选择依据和注意事项。
1.葡萄糖的作用原理
葡萄糖在BOD测定中主要作为微生物代谢的底物,为异养微生物提供能量和碳源。其分解过程消耗溶解氧,通过氧消耗量间接反映水样中有机物的降解程度。当水样本身碳源不足时,需补充适量葡萄糖以确保微生物活性。
2.用量确定的基本方法
(1)空白试验需求:通常空白样葡萄糖添加量为150mg/L,可满足5天生化需氧量测试的基本需求。
(2)水样稀释原则:对于高浓度有机废水,需先稀释至BOD5预期值在2-8mg/L范围,再补充葡萄糖至总碳源浓度不超过300mg/L。
(3)梯度验证:建议通过0mg/L、100mg/L、200mg/L三个浓度梯度进行预实验,选择氧消耗量处于线性增长阶段的用量。
3.影响因素分析
(1)微生物种群差异:不同来源的接种液对葡萄糖利用效率存在20%-30%的波动,需通过预培养稳定微生物群落。
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(2)温度补偿:20℃标准条件下每升高1℃,葡萄糖代谢速率增加约4%,需相应调整用量。
(3)pH缓冲要求:葡萄糖降解会降低体系pH,当用量超过250mg/L时需增加磷酸盐缓冲液浓度至0.05mol/L。
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4.操作注意事项
(1)灭菌处理:添加前需将葡萄糖溶液在121℃下灭菌15分钟,避免引入外来微生物。
(2)混合均匀:建议采用磁力搅拌器混合至少3分钟,确保水样与葡萄糖充分接触。
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(3)平行样设置:每个梯度至少设置3个平行样,单个样品偏差应小于15%。
(4)残留检测:测试结束后需检测剩余葡萄糖浓度,理想残留量应小于初始添加量的10%。
5.常见问题处理
(1)氧耗尽情况:当DO降至0.5mg/L以下时,需减少葡萄糖用量或增大水样稀释倍数。
(2)硝化干扰:出现异常高耗氧时,可添加0.05mg/L烯丙基硫脲抑制硝化作用。
(3)沉淀处理:葡萄糖与某些金属离子会产生絮凝,可通过0.45μm膜过滤后使用。
6.数据记录规范
(1)需记录葡萄糖生产批号、纯度(≥99%)和配制日期。
(2)保存标准曲线:每次新购葡萄糖应制作COD-Glucose标准曲线,斜率应在0.75-0.85范围内。
(3)异常标注:对超出预期值20%的数据点需备注可能原因。
通过系统控制葡萄糖用量,可使BOD测定值相对标准偏差控制在8%以内。实际操作中建议建立实验室自身的用量数据库,针对不同类型水样制定补充标准。定期用标准物质验证(如谷氨酸-葡萄糖混合标准液),可有效保证测定体系的可靠性。注意葡萄糖溶液需现配现用,4℃保存不超过48小时,避免微生物提前消耗。
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