ICG-Maleimide，2143933-81-5，吲哚菁绿-马来酰亚胺的实验方案

一、试剂基本信息
英文名称：ICG-MAL，ICG-Maleimide，Indocyanine green-MAL，Indocyanine green-Maleimide
中文名称：吲哚菁绿-马来酰亚胺
CAS号：2143933-81-5
分子式：C51H56N4O6S
分子量：853.08
试剂规格：5mg，10mg，25mg
纯度等级：≥95%
外观描述：绿色至深绿色固体
存储条件：建议存放于-20℃以下环境，保持冰冻、干燥，并避光保存。
溶解性能：本产品溶于部分有机溶剂。
二、使用注意事项
1.请注意避免频繁解冻，建议现配现用，确保产品性能稳定。
2.使用过程中务必保持产品干燥，避免阳光直射。
三、试剂结构式：

四、【实验方案】
1. 蛋白制备
1) 为获得最佳标记效果，请将蛋白 (抗体) 浓度配制成 2 mg/mL。
2) 蛋白溶液的 pH 值为 6.5±0.5。
3) 如果蛋白浓度低于 2 mg/mL，标记效率会显著降低。为了获得最佳标记效率，建议最终蛋白浓度范围为 2-10 mg/mL。
2. 染料制备
将无水 DMSO 加入 ICG Maleimide 溶液中，配制成 10 mM 的原液。用移液器吹打或涡旋振荡混匀。
3. 染料用量计算
反应所需的 ICG Maleimide 用量取决于待标记蛋白质的量，ICG Maleimide 与蛋白质的最佳摩尔比约为 。
示例：假设蛋白质浓度为 10 mg/mL，分子量约为 200 kDa，则蛋白质浓度约为 0.05 mM。 4. 进行偶联反应
1) 将 5 µL 染料原液 (10 mM) 加入装有 95 µL 蛋白质溶液的小瓶中，并充分摇晃。
在溶液中轻轻摇晃混匀，然后短暂离心，将样品收集到反应管底部。不要充分混匀，以防止蛋白质样品变性和失活。
2) 将反应管置于暗处，室温下轻轻孵育 60 分钟，每隔 10-15 分钟轻轻颠倒反应管数次，使两种反应物充分混合，提高纯化效率。
五、功能优势
1.近红外成像优势
发射波长（810 nm左右）位于“生物光学窗口”，可穿透深层组织，显著降低背景噪声，提升成像信噪比。
适用于活体动态追踪，如小鼠模型中的药物分布监测。
2.高特异性标记
马来酰亚胺基团与半胱氨酸的巯基形成稳定硫醚键，实现对蛋白质、抗体、纳米载体等的精准共价修饰。
需注意：标记前需用还原剂（如DTT）预处理蛋白质以打开二硫键，暴露游离巯基。
3..荧光可激活特性
与某些抗体偶联时可能因H-二聚体形成导致荧光淬灭，但结合靶标后（如细胞表面受体）荧光恢复，适用于设计“智能”激活型探针。
六、相关试剂推荐
Cy7-C9；N-decyl-N'-decyl-Cy7 (Cyclohexene), iodide；3032690-53-9
1802626-09-0；Cyanine 7 bis-acid
Cyanine 7 bis-COOH；花菁染料CY7双羧酸
400051-84-5；Cyanine5-Sulfo-NHS
Cyanine5一端连接磺酸一端连接活性酯
IR820-NHS；IR820 SE
Neo-Cyanine5；427882-84-6；碘乙酰胺CY5
SYTO 9 (10,000× in DMSO) LAMP用核酸染料
Sulfo-Cyanine5.5-Phenylboronic Acid；磺化Cyanine5.5苯硼酸
Sulfo-Cyanine7 maleimide（乙基），Sulfo-Cy7 Mal
四磺酸-环己烯CY7-酪胺（三氟乙酸盐）
1185760-22-8
Sulfo-Cyanine5 NHS ester（甲基）
2230212-27-6
Cyanine7.5 dimethyl，Cy7.5 dimethyl
sulfo Cyanine5 hydrazide，sulfo-Cy5 hydrazide
2055138-61-7
Cyanie3B NHS ester；Cy3B 活性酯；Cyanie3B 琥珀酰亚胺酯
Cyanine3B azide，Cyanine3B N3
1914113-85-1
260430-02-2，Cyanine2 carboxylic acid，Cy2 羧酸
IR825 alkyne，IR-825 alkyne
Cyanine5-DSPE，Cy5-DSPE，菁染料标记二硬脂酰磷脂酰乙醇胺
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