液体冲击式采样法
试验设备:环仪仪器气雾柜和气雾室
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消毒剂试验在1m³的气雾柜(或20m³~30m³ 的气雾室)中进行,消毒器械试验在20 m³~30m³ 气 雾室内进行。
菌悬液的配制:
取3~8代白色葡萄球菌18h~24h 新鲜培养物,5mL营养肉汤培养基反复吹洗,洗下菌苔,用营养 肉汤稀释至浓度为5×10³CFU/mL~3×10⁴CFU/mL, 备用。
试验操作:
试验分组及操作步骤如下:
a) 第 1 组:在1 m³ 气雾柜(或20 m³~30m³气雾室)里喷雾硬水,喷雾剂量与产品说明书中消 毒剂的使用剂量相同,待喷雾结束后,作用至消毒预定时间,立即用装有10 mL 含中和剂采样 液的采样器进行采样,空气采样体积与空气消毒鉴定试验预设消毒后采样时间(或采样体积) 相同,采样结束后,作用10 min, 在采样液中加入0.1mL 菌悬液,混匀,分别吸取1.0 mL 接 种于两个平皿中,置36℃±1℃培养箱内进行菌落计数培养,48 h 记录试验结果。该组观察 含中和剂的采样液对试验菌生长有无抑制作用。
b) 第 2 组:在1 m³ 气雾柜(或20 m³~30m³气雾室)里喷雾消毒剂,喷雾剂量与产品说明书中 消毒剂的使用剂量相同,待喷雾结束后,作用至消毒预定时间,立即用装有10 mL 含中和剂采 样液的采样器进行采样,空气采样体积与空气消毒鉴定试验预设消毒后采样时间(或采样体积) 相同,采样结束后,作用10 min, 在采样液中加入0.1mL 菌悬液,混匀,分别吸取1.0 mL 接 种于两个平皿中,置36 ℃±1℃培养箱内进行菌落计数培养,48 h 记录试验结果。该组观察 含中和产物的采样液对试验菌生长有无抑制作用。
c) 第 3 组:在1 m³ 气雾柜(或20 m³~30m³气雾室)里喷雾硬水,喷雾剂量与产品说明书中消 毒剂的使用剂量相同,待喷雾结束后,作用至消毒预定时间,立即用装有10 mL 采样液的采 样器进行采样,空气采样体积与空气消毒鉴定试验预设消毒后采样时间(或采样体积)相同,
采样结束后,作用10 min, 在采样液中加入0.1 mL 菌液,混匀,分别吸取1.0 mL 接种于两 个平皿中,置36℃±1℃培养箱内进行菌落计数培养,48 h 记录试验结果。该组作为菌数对 照;
d) 第 4 组:分别吸取稀释液、采样液各1.0 mL 于无菌平皿内,倒入上述试验同批次的培养基
15 mL~20 mL, 置36 ℃±1 ℃培养箱内进行培养。该组作为阴性对照。
评价规定:
试验结果符合以下全部条件时,可判断所选中和剂合格。
a) 第1~3 组菌量为50 CFU/mL~300 CFU/mL, 三组间菌落数误差率应不超过15%。三组间菌落数误差率按公式(3)计算。
b) 第 4 组无菌生长。否则,说明试剂有污染,应更换无污染的试剂重新进行试验
c)试验重复3 次,每次试验均应符合以上条件。
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