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怪不得人家发 Nature,原来连 WB 的做法都和我不一样

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我这 WB 结果又被审稿人怼了!说内参和目的蛋白跑平行胶不可信……

正常,你没看最新那篇 Nature 吗?人家直接把内参和目的蛋白做在同一张膜上,连编辑都点名夸数据扎实。

同一张膜?那怎么避免信号干扰,还能精准检测啊?

师弟连夜扒开了 Nature 高分文献,终于挖到了顶刊科研人私藏的 WB「通关秘籍」!

这篇 Nature 文章通过将纯化早期核内体的交联和天然凝胶质谱与 AlphaFold 和计算分析相结合的研究方式,创建了一个系统的人核内体结构相互作用组。在这项解析人类早期内体复合物结构的重磅研究中[1],研究团队通过创新的蛋白质分析技术,成功绘制了内体复合物的结构图谱。该研究采用 Stain-Free 免染成像技术,对早期内体复合物的蛋白质组成进行了精确分析。该技术不仅能够准确鉴定复合物中的关键蛋白,还能够实时监测蛋白质在不同实验条件下的表达变化,为复合物结构功能研究提供了可靠的数据支持。

不同于传统 WB 繁琐的考马斯亮蓝染色、脱色流程,这项技术简直像给蛋白条带开了「高光特效」:电泳结束后,只需将凝胶放入 Bio-Rad 设备,通过紫外激活凝胶中的三卤化合物,蛋白质就能自发荧光,瞬间实现无染色可视化!

图 1. Stain-Free 技术呈现的蛋白条带,背景干净,低丰度蛋白清晰可见

实验结果更是惊艳:

高灵敏度与高分辨率:条带边缘锐利清晰,相较于传统染色方法,其避免了染色不均、脱色误差等问题,极大提升了数据的重复性与定量准确性。

高效精准定量:避免了染色 / 脱色步骤引入的误差,重复性高达 98%,电泳结束后仅需 1分钟即可成像,大幅缩短实验周期,加速研究进程。

非侵入性分析:无需使用染色试剂,避免了对蛋白质结构和功能的潜在影响,为后续的蛋白质鉴定和分析保留了完整性。

采用荧光 Western Blot 技术,无需繁琐剪膜步骤,仅通过两种荧光二抗对同一张膜进行孵育操作,就能实现两种目标蛋白的精准检测。

福利来了!Bio-Rad 成像仪现正开放免费试用活动,名额有限。只需扫描下方二维码提交申请,即有机会获取亲身体验新设备的机会。

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开启高效科研新体验!

ChemiDoc Go 荧光及化学发光成像系统

Bio-Rad ChemiDoc Go:顶刊同款 WB 神器,让数据「卷」 出天际!

ChemiDoc Go 的 Stain-Free 免染成像技术,借三卤化合物与蛋白质芳香族氨基酸共价结合形成荧光复合物,经 280nm 紫外光激发产生与蛋白浓度线性相关的荧光信号,通过高精度检测模块实现无染可视化与定量。

紧凑全能,空间救星:专为小空间设计,集成核酸 / 蛋白胶成像、化学发光、免染及双通道荧光成像,一台搞定多样实验。

超清像素,细节无忧:2,000 万物理像素 + 专业镜头,核酸条带、低丰度样本信号清晰可见,数据精准无遗漏。

双通道荧光,高效科研:520 nm 与 700 nm 双通道,轻松区分分子量相近蛋白,加速多重荧光 Western Blot 实验进程。

灵活光源,精准成像:透射紫外、落射绿光等多光源自由切换,搭配滤光片,适配各类荧光染料,数据真实可靠。

扫码试用,冲刺顶刊:告别设备占地、数据模糊难题,申请免费试用,用 ChemiDoc Go 助力 Nature 级成果!

还在为 WB 背景杂乱、定量不准、效率低下发愁?看看顶刊大佬们的选择 ——Bio-Rad ChemiDoc Go 用硬核实力证明:好的实验数据,真的能「照」进 Nature !

注:

1. 相关产品仅限科研使用,不作为临床诊断。

2. Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories,Inc. 在特定区域的商标。

3. 本活动的最终解释权归伯乐生命医学产品(上海)有限公司。

内容策划:潘成

内容审核:周育红

题图来源:图虫创意

参考文献

[1] Gonzalez-Lozano, M.A., Schmid, E.W., Miguel Whelan, E. et al. EndoMAP.v1 charts the structural landscape of human early endosome complexes. Nature (2025). https://doi.org/10.1038/s41586-025-09059-y

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