我这 WB 结果又被审稿人怼了!说内参和目的蛋白跑平行胶不可信……
正常,你没看最新那篇 Nature 吗?人家直接把内参和目的蛋白做在同一张膜上,连编辑都点名夸数据扎实。
同一张膜?那怎么避免信号干扰,还能精准检测啊?
师弟连夜扒开了 Nature 高分文献,终于挖到了顶刊科研人私藏的 WB「通关秘籍」!
这篇 Nature 文章通过将纯化早期核内体的交联和天然凝胶质谱与 AlphaFold 和计算分析相结合的研究方式,创建了一个系统的人核内体结构相互作用组。在这项解析人类早期内体复合物结构的重磅研究中[1],研究团队通过创新的蛋白质分析技术,成功绘制了内体复合物的结构图谱。该研究采用 Stain-Free 免染成像技术,对早期内体复合物的蛋白质组成进行了精确分析。该技术不仅能够准确鉴定复合物中的关键蛋白,还能够实时监测蛋白质在不同实验条件下的表达变化,为复合物结构功能研究提供了可靠的数据支持。
不同于传统 WB 繁琐的考马斯亮蓝染色、脱色流程,这项技术简直像给蛋白条带开了「高光特效」:电泳结束后,只需将凝胶放入 Bio-Rad 设备,通过紫外激活凝胶中的三卤化合物,蛋白质就能自发荧光,瞬间实现无染色可视化!
图 1. Stain-Free 技术呈现的蛋白条带,背景干净,低丰度蛋白清晰可见
实验结果更是惊艳:
高灵敏度与高分辨率:条带边缘锐利清晰,相较于传统染色方法,其避免了染色不均、脱色误差等问题,极大提升了数据的重复性与定量准确性。
高效精准定量:避免了染色 / 脱色步骤引入的误差,重复性高达 98%,电泳结束后仅需 1分钟即可成像,大幅缩短实验周期,加速研究进程。
非侵入性分析:无需使用染色试剂,避免了对蛋白质结构和功能的潜在影响,为后续的蛋白质鉴定和分析保留了完整性。
采用荧光 Western Blot 技术,无需繁琐剪膜步骤,仅通过两种荧光二抗对同一张膜进行孵育操作,就能实现两种目标蛋白的精准检测。
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Bio-Rad ChemiDoc Go:顶刊同款 WB 神器,让数据「卷」 出天际!
ChemiDoc Go 的 Stain-Free 免染成像技术,借三卤化合物与蛋白质芳香族氨基酸共价结合形成荧光复合物,经 280nm 紫外光激发产生与蛋白浓度线性相关的荧光信号,通过高精度检测模块实现无染可视化与定量。
紧凑全能,空间救星:专为小空间设计,集成核酸 / 蛋白胶成像、化学发光、免染及双通道荧光成像,一台搞定多样实验。
超清像素,细节无忧:2,000 万物理像素 + 专业镜头,核酸条带、低丰度样本信号清晰可见,数据精准无遗漏。
双通道荧光,高效科研:520 nm 与 700 nm 双通道,轻松区分分子量相近蛋白,加速多重荧光 Western Blot 实验进程。
灵活光源,精准成像:透射紫外、落射绿光等多光源自由切换,搭配滤光片,适配各类荧光染料,数据真实可靠。
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注:
1. 相关产品仅限科研使用,不作为临床诊断。
2. Bio-Rad 是 Bio-Rad Laboratories,Inc. 在特定区域的商标。
3. 本活动的最终解释权归伯乐生命医学产品(上海)有限公司。
内容策划:潘成
内容审核:周育红
题图来源:图虫创意
参考文献
[1] Gonzalez-Lozano, M.A., Schmid, E.W., Miguel Whelan, E. et al. EndoMAP.v1 charts the structural landscape of human early endosome complexes. Nature (2025). https://doi.org/10.1038/s41586-025-09059-y
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