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PCR试剂和试剂盒怎么选?PCR试剂和试剂盒挑选攻略

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PCR即聚合酶链式反应,几乎是每个分子生物学实验室的支柱技术。这种方法简单、易用,可将DNA特定片段扩增几个数量级。默克针对各种PCR、qPCR和RT-PCR应用提供贯穿整个PCR流程的专用试剂盒。此外,请探索默克全面的PCR相关资源,包括PCR标准实验方案和PCR预混液计算工具。

默克Sigma-Aldrich为您提供稳健可靠的PCR试剂与试剂盒。创新来自日复一日的工作积累,作为实验工作必需的PCR产品更应严格遴选,打下良好基础,以免劣质品让辛劳付诸流水。

Direct PCR

Direct PCR技术无需DNA分离或纯化步骤,即可让科学家直接以植物、组织或细胞培养样品进行PCR。省却这些费力的额外步骤可节省大量时间和资源,改善可持续性。默克的Extract-N-Amp™ PCR试剂盒的独特之处在于,可为植物、组织和血液样品分析提供一种融萃取和扩增于一体的工艺流程。 Extract-N-Amp™ PCR 结合了“lyse & go”(裂解上样)方法,无需分离柱或漫长的酶解样品纯化过程。我们的direct PCR试剂盒随附从各种植物、血液和组织样品快速萃取和扩增目标物所需的试剂、酶和专用缓冲液。

热启动PCR

热启动PCR技术可在反应构建过程中抑制热启动Taq聚合酶活性或修饰dNTP聚合,直至热激活步骤启动。热启动PCR允许室温构建反应,不会出现非特异性扩增和引物二聚体形成。浏览我们丰富的热启动PCR酶选择,包括KOD、FastStart™、JumpStart™和 KAPA Biosystems 试剂。

KOD DNA聚合酶和预混液

KOD DNA 聚合酶是一种超高保真、热稳定性DNA聚合酶。无数独立研究证实了KOD DNA聚合酶具有高于其它嗜热聚合酶的高保真性。除了低突变频率外,KOD聚合酶的快速延伸和高合成性能还可以更短的反应循环数得到更高产率的全长产物。当速度和保真度至关重要时,上述特性让KOD DNA聚合酶成为首选PCR酶。默克的新 KOD One™ PCR 预混液,这是一种即用型 2x PCR 预混液,包含新型转基因KOD DNA聚合酶(UKOD)和新型延伸加速剂,从而以<10kb的模板DNA实现了延伸时间为5 s/kb 的快速PCR。

罗氏PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR试剂、实验方案和资源

为推动分子生物学研究进展,必须最大限度提高基因组学、蛋白质组学和细胞分析等多个领域的工作流程效率。作为基因组学和PCR技术的开创者,罗氏提供经反复优化的齐全试剂和试剂盒产品,减少实验室实操时间、加快数据采集和关键工具开发,可针对最复杂的生物学假设开展检验。

LuminoCT™, KiCqStart®, 和 JumpStart 定量 PCR (qPCR) 预混液试剂

定量PCR(qPCR)利用DNA扩增的线性原理,测定样品中已知序列的绝对或相对量。此类反应使用荧光报告基团,可以实时测定DNA产量。LuminoCt™基于充分优化的ReadyMix™化学试剂,具有测定速度快,同时不牺牲准确性、精密度或灵敏度的特点。LuminoCt™可与大多数qPCR仪无缝整合,因而可以最大限度避免反应条件优化。通常用户只需购买试剂盒,构建检测反应体系,随即可以开始测定。生成理想的qPCR数据从未如此快捷。

KiCqStart® ReadyMix™是高灵敏度即用型预混液,含有所有qPCR或RT-qPCR基本组分。只需添加引物、探针和水,即可配制成测定混合液。将混合液加入试管或微孔板中,再加入模板。KiCqStart® ReadyMix™试剂兼容各种传统或快速PCR方法。详情参见KiCqStart® Probe qPCR ReadyMix™ 或KiCqStart® 一步探针RT-qPCR ReadyMix™ 试剂的产品使用信息。另外,JumpStart Taq ReadyMixes试剂可为传统qPCR实验提供便捷的解决方案。JumpStart Taq抗体可进行抗体失活的热启动PCR,防止形成非特异性产物。该产品线适用于基于SYBR®Green和探针方法,支持各种优化方案,且兼容各种管、板和毛细管式仪器。更多信息请浏览我们的其他SYBR® Green的类qPCR试剂和资源。

RT-PCR和RT-qPCR:定制寡核苷酸和探针、DNase、试剂盒、预混液、引物等

RT-PCR融合了两种强大的通用技术(逆转录和聚合酶链式反应),从总RNA或mRNA转录本中合成并扩增cDNA。此方法常用于研究RNA和蛋白水平上的基因表达。理想的RT-PCR需要灵敏的逆转录和高保真度的扩增。所用逆转录酶应能检测极低丰度和/或含复杂二级结构的转录本。我们的增强型Avian(eAMV™)逆转录酶具备上述所有特性。作为一款理想的逆转录酶,它可检出其他逆转录酶可能错失的低丰度信息,非常适合发现复杂二级结构转录。相对于标准AMV、M-MLV、M-MLV RNase H–或AMV RNase H低活性逆转录,Avian逆转录酶对高温的耐受性更高。

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