湖北
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- 在检测试纸条上，固定有针对不同小鼠 IgG 亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3）的特异性捕获抗体。当含有小鼠单抗的样本滴加到试纸条加样区后，样本中的抗体在层析作用下向检测区移动。若样本中存在对应亚型的小鼠单抗，便会与检测区的特异性捕获抗体结合，形成免疫复合物，进而通过显色反应在检测线处呈现出肉眼可见的条带。
- 操作流程
- 样本准备：将待鉴定的小鼠单抗样本用适当的缓冲液进行简单稀释，确保抗体浓度在检测范围内。
- 加样操作：使用移液器吸取 10 - 15μL 稀释后的样本，缓慢滴加到检测试纸条的加样孔中。
- 结果判读：加样后，在 5 - 10 分钟内进行结果观察。若仅在质控线（C 线）出现一条红色条带，表明检测无效；若在质控线（C 线）和某一检测线（T 线，如 T1 代表 IgG1、T2 代表 IgG2a 等）同时出现红色条带，则对应检测线所代表的 IgG 亚型即为样本中抗体的亚型；若质控线（C 线）和所有检测线均未出现条带，也表明检测无效。
- 特点：快速高效，整个鉴定过程仅需 5 - 10 分钟；操作简便，无需复杂仪器设备；高准确性，采用高特异性的捕获抗体，有效避免交叉反应；成本低廉，相比传统方法所需试剂成本低；便于携带，检测试纸条体积小巧，适用于多种场景。
- 原理：采用间接法酶联免疫吸附试验，酶标板预先包被针对小鼠 IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3 及总 IgG 的特异性抗体，将待测样本处理后加入到酶标板中，再加入标记抗体孵育，最后通过显色液显色来判断抗体类型。
- 操作流程
- 样本准备：收集小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本，如有需要可进行稀释和预处理，确保样本质量满足检测要求。
- 加样：将处理后的样本加入到预包被的酶标板中，同时设置标准品孔和空白对照孔。
- 孵育：将酶标板在适当条件下孵育，使样本中的抗体与包被的特异性抗体充分结合。
- 洗板：孵育后用洗涤液清洗酶标板，去除未结合的物质。
- 加标记抗体：加入 HRP 标记的二抗，再次孵育，使二抗与结合在板上的抗体特异性结合。
- 显色和终止：加入显色底物（如 TMB），等待显色反应发生，随后加入终止液终止反应。
- 结果分析：使用酶标仪在特定波长下读取各孔的吸光值（OD 值），通过与标准曲线对比，确定样本中 IgG 各亚型的含量和浓度，从而判断抗体的亚型。
- 特点：灵敏度高，最低检测限可达 ng/mL 级别；特异性强，抗体专一性强，可准确鉴定各亚型；结果直观易读，通过酶联免疫实验平台可快速生成定性与定量的检测结果；可同时检测多种亚型，一次实验即可分析 IgG 所有六种亚型，节约时间和成本。
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