梅毒水平旋转仪：一文读懂梅毒血清学检查（一）：RPR和TRUST

梅毒水平旋转仪

什么是梅毒血清学检查？

当人体感染梅毒螺旋体后4周～10周，血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性抗体（反应素）和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。这些抗体均可用免疫学方法进行检测。血清学检查是辅助诊断梅毒的重要手段。

根据检测所用抗原不同，梅毒血清学试验分为两大类：

一类为非梅毒螺旋体血清学试验（又称梅毒非特异性抗体试验），主要包括VDRL、RPR、TRUST等；

另一类为梅毒螺旋体血清学试验（又称梅毒特异性抗体试验），包括TPPA、FTA-ABS、ELISA、CLIA、RT等。临床上可根据实验室条件选择任何一类血清学检测方法作为筛查（初筛）试验，但初筛阳性结果需经另一类梅毒血清学检测方法复检确证，才能够为临床诊断或疫情报告提供依据。有条件时亦可同时做这两类试验。

非梅毒螺旋体血清学试验

原理

梅毒螺旋体一旦感染人体，人体迅速对被损害的宿主细胞以及梅毒螺旋体细胞表面所释放的类脂物质作出免疫应答，在3周～4周产生抗类脂抗原的抗体（亦称为反应素）。这些抗体主要是IgG和IgM型混合抗体。非梅毒螺旋体试验是使用心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原的絮状凝集试验。反应素与心磷脂形成抗原抗体反应，卵磷脂可加强心磷脂的抗原性，胆固醇可增强抗原的敏感性。心磷脂、卵磷脂遇水形成胶体溶液，胆固醇遇水形成结晶。当抗原与抗体（反应素）混合发生反应时，后者即粘附胶体微粒的周围，形成疏水性薄膜。由于摇动、碰撞，使颗粒与颗粒互相粘附而形成肉眼可见的颗粒凝集和沉淀，即为阳性反应。如遇到非梅毒血清，因体液中的白蛋白多于球蛋白，而白蛋白对胶体颗粒有保护作用，形成亲水性薄膜，即使同样摇动、碰撞，由于抗原颗粒周围没有粘附免疫球蛋白的作用，不能形成较大颗粒，无肉眼可见的凝集和沉淀，因此为阴性反应。VDRL、RPR和TRUST等试验均为此类试验，它们所采用的抗原成分相同，敏感性和特异性基本相似。

RPR环状卡片试验

原理

RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。该法是在抗原中加入活性炭颗粒作为指示物，加入了氯化胆碱，因此血清不需灭活。特制的白色纸卡替代了玻片。试验结果易于判断，肉眼即可观察。也可用血浆进行检测，试验结果可保存。抗原放4℃冰箱可保存1年。

材料

材料如下：

a) RPR 试剂盒：含 RPR 抗原，直径为 18mm 圆圈的特制白色反应卡片，标准针头（60 滴/mL±1 滴

/mL），RPR 试验结果图片；

b) 其他：可调水平旋转器。

定性试验

具体步骤如下：

a) 吸取 0.05 mL 血清或血浆加于卡片圈内，并均匀地涂布在整个圈内（每张纸卡有 10 个或 12

个反应圈）；

b) 将抗原轻轻摇匀，用标准针头吸取抗原，每个标本加 1 滴抗原；

c) 将卡片置水平旋转器旋转 8 min，（100±5）r/min；

d) 立即在明亮光线下观察结果。

结果判读及报告

3+～4+：大或中等大小的絮状物，液体清亮。

2+：小到中等大小的絮状物，液体较清亮。

1+：小的絮状物，均匀分布，液体混浊。

–：仅见抗原颗粒集于中央一点或均匀分散。

结果报告：出现1+～4+强度的凝集反应报告阳性，为产生凝集反应报告阴性。

定量试验

RPR定量试验的指证与VDRL试验相同。其具体步骤如下：

a) 在圈内加入 0.05 mL 等渗盐水（一般作 6～8 个稀释度），勿将盐水涂开。

b) 吸取 0.05 mL 血清或血浆作系列稀释（1:2～1:64），当稀释到最后的第 6 孔时，弃去 0.05 mL

稀释液。从第 6 孔起将血清稀释液涂布整个圈内，再涂布第 5 孔，依次向前到第 1 孔。

c) 滴加抗原，旋转时间、速度和观察结果同定性试验。

TRUST试验

原理

TRUST试验原理与RPR试验原理相同。唯TRUST试验的抗原中加入甲苯胺红颗粒代替活性炭颗粒指示物，使阳性结果出现红色絮状现象，阴性结果见红色颗粒集于中央或均匀分散。

方法

TRUST试验方法及结果判读均与RPR试验相同。

注意事项

实验环境温度应为23℃～29℃，抗原应保存于4℃冰箱，试验前应恢复到室温。抗原应防止 冻结，以免抗原被破坏。

校准针头，VDRL、RPR和TRUST等抗原为（60±1）滴/mL。

血液标本应防止污染，放置室温应在24 h内完成。如血清56℃灭活或放4℃保存，在试验前 应恢复适宜温度后再开始试验。

试验完毕，应立即观察结果。

临床意义

非梅毒螺旋体血清学试验方法简便、快速，敏感性和特异性较高。对一期梅毒的敏感性为74％～87％，二期梅毒达100％，三期梅毒34％～94％。特异性96％～99％。

非梅毒螺旋体血清学试验适用于各期梅毒的诊断。早期梅毒经治疗后血清滴度可下降或转阴，故可用于疗效观察、判愈、判定复发或再感染。也适用于人群的筛查、产前检查及健康体检等。

非梅毒螺旋体血清学试验可出现“前带现象”，应在临床上注意识别。

VDRL试验适用于神经梅毒的脑脊液检查，特异性高，但敏感性低。

非梅毒螺旋体血清学试验可在某些传染病及胶原性疾病时出现假阳性反应，因此对阳性反 应结合临床进行鉴别，或作梅毒螺旋体血清学试验以进一步证实。

水平旋转仪简介