发现实验室污染的方法主要包括以下几种:
空气沉降检测:在试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的实验台面上、生物安全柜内部和核酸提取仪内部分别放置开盖装有生理盐水(或去RNA酶水)的EP管,过夜。通过观察是否有污染物的沉降来判断是否存在气溶胶污染。
物表检测:用采样拭子蘸生理盐水(或去RNA酶水)分别对试剂准备区、样本制备区和扩增分析区的洁净工作台、生物安全柜内部、离心机内部、核酸提取仪和荧光PCR仪内反复擦拭后,放入生理盐水(或去
RNA酶水)中进行洗脱。通过检测洗脱液是否存在污染来判断物表是否存在污染。
移液器检测:将配液的移液器和加模板的移液器分别换上无滤芯枪头,在生理盐水(或去RNA酶水)中反复吹吸10次,并取样检测移液器内部和表面是否存在污染。
定期监测:每天对实验室内空气进行采样监测,定期对实验室台面、门把手、仪器设备表面进行取样监测,阳性样本采用另外一到两种更为灵敏且扩增不同区域的核酸检测试剂对原始样本进行复核检测。
实验室污染的来源和防控措施:
污染来源:实验室污染的主要来源包括扩增产物的污染、天然基因组DNA的污染、试剂污染(贮存液或工作液)以及样本间交叉污染。其中,扩增产物的污染是最常见的污染类型。
防控措施:
严格执行实验室规章制度:确保所有人员接受必要的培训和教育,掌握实验室操作规程。实验前使用紫外灯消毒工作台,实验后用75%酒精擦拭台面。废弃物要进行高压蒸汽灭菌后处理3。
定期消毒实验室设备:定期对培养箱、无菌室等进行消毒,可以使用蚁醛或PP粉。控制湿度和温度,保持实验室干燥清洁,防止细菌和真菌的繁殖。
确保实验室人、物及空气单向流动:核酸检测实验室应当设置试剂储存和准备区、样本制备区、扩增和产物分析区,各区域在物理空间上应当是完全相互独立的,传递窗应满足密封性要求,不能有空气的直接相通。
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