在实验室中,菌落计数仪和拍击无菌均质器的组合应用,特别是在食品微生物检测中,涉及一系列具体而细致的操作步骤。以下是对这些步骤的详细描述:
1. 样品准备
- 取样:根据检测需求,从待检食品中随机或定点取样。取样时应避免污染,确保样品的代表性。
- 预处理:对于固体或半固体样品,如肉制品、乳制品等,需进行初步的破碎、混匀处理,以便后续均质。液体样品则可直接用于均质处理。
2. 拍击无菌均质
- 设备准备:将拍击无菌均质器连接至电源,检查设备是否正常工作。同时,准备好无菌均质袋或均质杯,确保无破损、无污染。
- 样品均质
- 将预处理后的样品与适量的稀释液(如磷酸盐缓冲液或生理盐水)按一定比例(如1:10)混合,加入到无菌均质袋或均质杯中。
- 将均质袋或均质杯放入拍击无菌均质器中,设定合适的拍击速度和时间(如8000-10000 r/min,1-2分钟),启动设备进行均质处理。
- 均质过程中,样品在拍击力的作用下被充分破碎、混匀,形成均匀的样品匀液。
3. 样品稀释
- 梯度稀释:根据实验需要,将均质后的样品匀液进行梯度稀释,如制备1:100、1:1000等稀释度的样品匀液。稀释时,应使用无菌吸管或移液器,确保操作的无菌性。
- 稀释液选择:稀释液通常选择磷酸盐缓冲液或生理盐水,这些稀释液能够保持微生物的活性,同时减少样品中的杂质干扰。
4. 接种与培养
- 接种:将稀释后的样品匀液分别接种到无菌的培养基上。接种方法可采用倾注法或涂布法,确保样品在培养基上均匀分布。
- 培养:将接种后的培养基置于适宜的温度和湿度条件下进行培养。培养条件应根据待检微生物的种类和特性而定,如细菌通常在36±1℃下培养48±2小时。
5. 菌落计数
- 观察与计数:培养完成后,使用菌落计数仪对培养基上的菌落进行计数。菌落计数仪通过自动扫描和识别技术,能够快速、准确地计算出菌落数量。
- 结果记录:记录每个稀释度下的菌落数量,并选取菌落数在30-300 CFU之间的平板进行菌落总数计算。低于30 CFU的平板记录具体菌落数,大于300 CFU的平板记录为多不可计。
- 结果计算:根据计数结果和稀释倍数,计算出原始样品中的菌落总数。结果通常以CFU/g(固体样品)或CFU/mL(液体样品)表示。
注意事项
- 在整个实验过程中,应严格遵守无菌操作规程,防止样品污染。
- 使用的仪器和设备应提前进行清洁和灭菌处理。
- 培养基和稀释液等试剂应确保新鲜、无污染。
- 计数时,应仔细辨别菌落形态和特征,避免重复计数或漏计。
通过上述步骤的精心操作,菌落计数仪和拍击无菌均质器的组合应用能够准确、快速地完成食品中微生物的检测工作,为食品安全提供有力保障。
一、菌落计数仪 简介
无锡沃信VS-J2和VS-J3型菌落计数器是专为微生物实验室设计的实验设备,用于快速、准确地计数和记录培养基上的微生物菌落。这两款设备在微生物学、食品科学、制药工业等领域有着广泛的应用。
技术参数:
二、拍击式无菌均质器的简介
【产品简介】
技术参数:
【1】产品型号:VOSHIN-600R【
【2】有效容积:3~400ml
【3】设备规格:W280*D440*H260mm
【4】拍击间距:0~50mm可调
【5】观察视窗:4个
【6】压印拍板:2块
【7】整机重量:18Kg
【8】速度调节:1~10级
【9】发动机速度自动调节功能【10】均质袋专用封口夹2只
→可连读& 1秒~60分钟,自由调节→实现分:秒或小时:分等单位选择(可在内部进行变更)→Timer运行完成时,发出蜂鸣声(可调节时间)→停电恢复时,按照剩余时间运行(时间记忆功能:每2分钟储存一次)
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