脑声常谈丨钢丝悬挂测试（Wire Hang test）实验步骤与注意事项

钢丝悬挂测试（Wire Hang test）可检测肌肉力量的神经肌肉异常，是一项简单的测试，可评估握力、平衡性和耐力。对于此测试，使用金属丝笼盖并在边缘周围贴上胶带，以防止鼠从边缘走开。将动物放置在笼盖的顶部，然后轻轻摇动盖子，迫使鼠抓住电线。然后，将盖子慢慢地翻转过来，足够高以防止鼠跳下，但又不足以在跌落时造成伤害。测量动物跌倒之前的时间，使用90或300秒的截止时间。该测试通常用于测试不同疾病的动物模型的基本神经肌肉变化，如帕金森病、肌萎缩侧索硬化症、亨廷顿病、多发性硬化症等。测试旨在评估中枢神经系统疾病啮齿动物模型的运动功能和缺陷。该测试用于对转基因小鼠品系进行表型分析，并评估新型化学实体对运动性能的影响，钢丝悬挂似乎是评估中风后早期和晚期时间点缺陷的合适测试。

实验步骤

训练小鼠通过抓住一根拉在两根柱子之间、距地面50至60厘米的金属丝来悬挂身体。为了防止动物使用所有四个爪子，后肢轻轻地用胶带覆盖。两根柱子之间有一个枕头，以避免小鼠跌落时受伤。“跌倒潜伏期”是用于评估运动表现的主要终点。局灶性缺血会导致对侧爪子的感觉运动障碍，并显著降低动物的悬挂能力。与“倒置网格悬挂测试”（通常也称为“钢丝悬挂测试”，即动物用四只爪子抓住笼盖）相比，小鼠在钢丝悬挂测试中处于更具压力和挑战性的位置。这使得动物更有可能放手并试图逃跑，这种情况在手术的急性期可能会进一步加剧。因此，有必要进行预训练以增加尽可能长时间坚持的动力。在训练过程中，小鼠被迫用前爪抓住电线，然后实验者慢慢松开，直到它们必须支撑自己的体重。如果动物沿着铁丝移动并到达柱子，则可以在铁丝上放置小块纸板以防止逃跑。实验者应让动物短时间悬挂（例如10至20秒）进行多次试验，然后将动物放回笼中。如果动物在训练结束前跌倒，则应立即将其放回并强迫其抓住钢丝。试验结束后，动物才应被带回各自的笼子。经过最初的习惯训练后，动物被训练悬挂更长时间。

在攀爬条件下（即对照条件），将小鼠饲养在带有不锈钢丝网盖的标准塑料笼（20 × 30 × 20cm）中。在非攀爬条件下，将小鼠饲养在与对照小鼠相同的标准塑料笼中，但为了防止丝网攀爬，不锈钢丝网盖上覆盖有有机玻璃。测试开始时，动物悬挂在高架铁丝笼顶部。将动物放置在笼子顶部，然后将其倒置并悬挂在家庭笼子上方；记录动物跌倒时的潜伏期。该测试每周进行三天，每次测试三次，以三次试验的平均值表示。测试通常持续一周，但最长可以持续三周。

钢丝悬挂测试可成功区分假手术动物和MCAo动物，并在30分钟和60分钟短暂的MCAo中检测早期和晚期时间点（长达3周）不同治疗的神经保护作用。

注意事项

由于每只动物的表现不同，因此没有固定的训练次数。根据经验，训练有素的动物应该（1）不要用四只爪子抓住电线；（2）不要在电线上来回移动；（3）反复调整握持姿势直到精疲力竭。根据经验，129/SV小鼠只需几次训练即可轻松训练，训练有素的幼鼠可以坚持超过300秒；（4）C57Bl/6品系可能不太适合钢丝悬挂，因为训练问题（根据经验，它们更加挣扎并且更有可能逃脱/放开钢丝）和低耐力。

文献引用

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