摆脱细胞实验室支原体污染的方法

当下，从生物石油至药品、医疗等诸多方面，都与生命科学紧密相连。而细胞培养作为整个生命科学研究中最为基础的实验技术，在干细胞生物学与疫苗研发等领域的发展及应用方面，很大程度上依赖于细胞培养技术的进步。

细胞培养是将组织或原代外植块的细胞分散开来，使其成为细胞悬液，再将其置于固体基质上贴壁生长，或者使其在培养基中悬浮生长。

细胞株是生命科学研究的关键材料，零污染的细胞株更是获取可靠实验数据的先决条件。细胞株的微生物污染源通常有细菌、真菌、支原体等。其中，支原体污染率颇高，达 30％～60％。支原体又名霉形体，直径在 0.1-0.3μm，是目前所发现的最小、最简单的原核生物。它能轻松透过滤膜，混入培养系统，呈现高度多形性，有多种形态，如球形、杆形、丝状、分支状等。通常依附于细胞膜表面，即便在常规传代培养中，也能有效传播。

实验室中常见的支原体种类有：口腔支原体、猪鼻支原体、发酵支原体、人型支原体、唾液支原体、肺支原体、梨支原体等。

细胞株一旦遭受支原体感染，培养基通常不会出现颜色变化。支原体附着在细胞株表面，通过抢夺细胞培养基中的养分实现增殖。在其繁殖过程中，除消耗培养基中的各种养分外，还会改变培养基的 pH 值，甚至产生对细胞株有毒害的代谢产物，从而致使细胞状态发生改变。

尽管支原体污染不会导致细胞株即刻死亡，却会影响细胞内的各种参数，如改变细胞膜抗原性、细胞新陈代谢、干扰核酸合成、改变 DNA 转染效率、导致染色体畸变等，在多方面产生深远影响，严重影响培养细胞各项参数的准确度。

支原体污染的潜在途径众多：

1. 受污染的培养基、试剂或仪器，涵盖无菌试剂和材料、层流超净工作台、恒温恒湿培养箱、水浴锅、冰箱等。

1. 实验室人员（约 80.6 %的技术人员为支原体携带者）。

1. 其他实验室的被感染培养物。

在实验室培养条件下，多种支原体同时污染的情况屡有发生，这成为令大多数实验室极为困扰的问题。保持无菌状态，对于新手和老手而言，均是一项巨大的挑战。体外培养的细胞缺乏免疫系统，因此，控制污染的方式在于预防污染！

细胞实验室传统的消毒流程如下：

用消毒酒精擦拭台面。打开超净工作台和细胞房的紫外灯，照射 1~2h。需要注意的是，紫外灯开启后，人不能进入实验室，因为紫外线对眼睛和裸露的皮肤均有危害。若要进入，操作人员必须先关闭紫外灯，待人员离开后再重新打开。

与之相比，润联旗下的高端智能化消毒设备欧菲姆KV-BOX操作简便，设备体积小、重量轻，通电后即开即用，可随时启停。消毒者能在实验室外远程控制整个消毒过程，从而避免在正常时间及突发状况下，操作人员因关闭设备而暴露在消毒过程中。

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