白虾养殖中使用的抗生素替代产品已得到广泛研究,世界许多地方都报道了草药和草药提取物在控制水产养殖疾病方面的良好效果。
本研究旨在探讨Solanum Procumbens Lour(海南茄)对白对虾生存率、生长性能、先天免疫和预防副溶血弧菌 (VpAHPND) 引起的急性肝胰腺坏死的影响。
一、海南茄提取物简介
海南茄提取物,是根据适当的方法从茄科植物Solanum hainanense中提取的。
①特点:
海南茄提取物质地柔软、均匀,呈深棕色,具有特有的香气;
干燥的海南茄为黄棕色、均匀的干燥粉末,具有特有的香气;
②活性成分:海南茄含有胆固醇、β-谷甾醇、羊毛甾醇和二氢羊毛甾醇...,此外还含有生物碱、糖生物碱、皂苷、氨基酸。
海南茄是一种药用植物,味微涩,性温,是当今肝脏解毒效果最好的植物。海南茄是传统医学公认的珍贵草药,具有稳定肝细胞、增强肝功能的作用。如今,现代医学研究证明,茄属植物具有对肝脏有价值的活性成分。尤其是该药对乙型肝炎的辅助治疗非常有效。
海南茄 (Solanum procumbens) 的提取物,比干燥植物含有更高含量的活性成分。海南茄具有辅助治疗人体某些肝脏疾病的作用,如帮助增强肝功能、再生和保护肝脏;帮助肝脏解毒,降低肝酶;恢复因兴奋剂受损的细胞。
二、对虾养殖业概况:抗生素和弧菌
对虾养殖在全世界水产养殖中发挥着重要作用,为沿海地区提供了重要的收入来源,有助于减少贫困。白对虾是最重要的养殖虾种之一,占全球养殖虾产量的82.7%,虾产量通常由中国、泰国、印度尼西亚、越南、厄瓜多尔和印度主导(Boy 等人,2021)。
在过去的几十年里,与几种机会性弧菌相关的虾病对虾养殖构成了威胁(Valente 和 Wan,2021)。最近,由携带pirAB基因的副溶血弧菌(VpAHPND)引起的对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)被认为是对虾养殖,特别是白对虾和斑节对虾养殖中最严重的疾病之一。
抗生素已广泛应用于水产养殖中以控制水生动物疾病,但抗生素的使用会带来负面影响,例如:细菌对抗生素产生耐药性,以及鱼虾中的抗生素残留。
多项研究表明,药用植物可以作为抗生素的替代品,因为它们含有生物碱、萜类化合物、皂苷和黄酮类化合物等活性分子,可以提供抗菌、抗真菌、抗病毒和抗寄生虫、促进生长和免疫刺激的作用。
海南茄广泛分布于越南和热带国家(MNNH和Chagnoux,2022)。它被认为是一种草药植物,用于治疗一些人类疾病,如肝炎、肝硬化和高肝酶(Hien et al., 2018)。
据Hai等人(2018)的报告显示,在越南湄公河三角洲收集的海南茄提取物含有多种生物活性化合物。比如:类固醇皂苷,该化合物被鉴定为具有预防心血管疾病、抗炎、抗菌和抗癌特性的生物活性化合物。
然而,到目前为止,还没有有关海南茄在水产养殖中的作用的信息。因此,本研究将探讨海南茄提取物对白对虾成活率、生长和先天免疫的影响,并预防对虾养殖中的VpAHPND。
三、材料与研究方法
1、该实验于2021年3月至2021年9月在越南茶荣省茶荣大学进行,海南茄购自当地传统药材店。使用Chaweepack等人(2015)描述的方法获得海南茄提取物。
简而言之,将干燥的海南茄磨成细粉。然后,将粉末以1:10的比例添加到70%的酒精溶液中,放置24小时,然后用纸过滤。使用真空蒸发器在50 ℃下蒸发所得液体。
将剩余的粗提物冻干,并保存在4℃下以供后续实验。
2、将P12虾苗(SPF无病原体)养殖至实验所需的大小,选择重量为5.33±0.13克的虾放入,装有15ppt海水的水箱中。
对虾养殖密度为50尾虾/水箱,每天给虾喂食四次商业颗粒饲料,其中添加了四种不同比例的海南茄提取物,分别为0.0%、0.5%、1.0%和1.5%。
饲喂前,将海南茄提取物称重并溶解在无菌水中,然后喷洒到颗粒饲料上。然后,将按每公斤饲料5毫升的比例涂上一层鱿鱼油。每天测量每个池中的盐度、pH、氧气、温度等水质参数;同时,每3天测量一次氨和硫化氢。
3、实验结束后,检查实验虾的存活率(SR)、生长反应和免疫参数。根据Chandran等人描述的公式计算实验虾的SR和生长反应,包括:增重(WG)、绝对生长率(AGR)和特定生长率(SGR)。
4、为了观察VpAHPND治疗的有效性,之前从茶荣大学学院水生疾病管理实验室储存于-80摄氏度感染AHPND虾中分离出pirAB基因阳性的副溶血性弧菌,作为攻击实验。
四、结果与讨论
1、存活率、生长性能和免疫反应:
图1显示,饲喂对照饲料并添加海南茄提取物的虾在30天后的处理之间的存活率(76%-78%)没有显着差异,添加和不添加提取物的虾之间的生长反应也没有显着差异(表1)。
2、关于免疫反应,虽然饲喂1.0%海南茄提取物的虾的THC和PO活性,高于饲喂0.0%和0.5%提取物的虾,但没有显着差异。值得注意的是,饲喂1.5%海南茄提取物虾的THC(图 2)和PO(图3)活性,显着高于其他组中记录的值。
3、许多药用植物可以在水产养殖中用作抗生素的替代品,因为它们含有有利于动物生长和免疫系统的活性分子。在这项研究中,喂食海南提取物的虾显示出THC和PO值等免疫参数的改善。
4、对抗VpAHPND:
表2显示,用VpAHPND攻击10天后,饲喂1.0%和1.5%海南茄提取物虾的累积死亡率(52.4%),显着低于饲喂0.0%和0.5%茄提取物的虾(分别为100%和90%)。
受感染的虾表现出AHPND的临床症状,如:肝胰腺苍白、萎缩、空腹和空肠。在攻击实验中,还从垂死的虾中分离出了携带pirAB基因的副溶血弧菌。
五、结论
简而言之,本研究中海南茄提取物可以增强虾的存活率和生长性能,该提取物还可以改善先天免疫参数,例如:增加THC和PO值,降低感染VpAHPND的虾的死亡率。
因此,海南茄提取物是增强白对虾先天免疫,并保护虾免受AHPND感染的材料。
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