“奶油”血引发的思考：脂血对离子检测的影响探究

作者 | 王浩

单位 | 沧州市中心医院

前 言

脂血标本的个体多为采血前食用了高脂肪含量的食物或过量的酒精，或是高脂血症的患者，他们的血浆层中有大量的糜微粒（CM）和极低密度脂蛋白（VLDL）。CM和VLDL中富含甘油三酯的脂蛋白乳，因为他们密度低故悬浮在血浆层，大颗粒的性状使光发生散射，外观则呈现出了肉眼可见的浑浊现象，即为脂血。

一般情况下，血液正常离体后，经高速离心，就可以在血清层清晰看到上层呈淡黄色，而脂血标本的血清层则呈现乳白色和不同程度的浑浊。脂血中的乳糜颗粒增多引起的脂浊会对生化检测常用比色或比浊产生极大的影响这一观念已经为大多数检验人员所熟知。然而在生化检测中，离子检测多采用选择电极法。那脂血会不会对离子的检测产生影响呢？

案例经过

某日笔者在审核生化结果时，发现了一例异常结果。生化仪器报警，标本脂血指数为69，如图1~2。

图1

图2

从检测结果可以看到患者的甘油三酯高达50.12mmol/L，查看患者的标本，可以发现患者的血清呈奶油状。如图3。

图3 患者的标本状态

当遇到高脂血的时候，本实验室采用高速离心机离心（12000转，15min）后，吸去除脂质上层后，再进行检测。所有报警项目所产生的问题基本上都会得到解决。本案例中，虽然患者的离子检测（钾钠氯）没有报警，但笔者也采用高速离心后去除脂质的上清进行检测。结果如图4、表1。

图4 患者高速离心前后离子的对比

表1高速离心前后离子结果的对比

很明显，高速离心后所有离子结果都升高了，那为什么会产生这种现象呢？哪个离子浓度才更接近患者的真实离子浓度呢？

案例分析

要解答这个疑问，首先我们要弄清离子浓度检测的原理。

本实验室生化分析仪是某品牌全自动生化分析仪，离子检测采用的是离子选择电极法（ISE法）。ISE法是利用电极电位和离子活度的关系来测定离子活度的一种电化学技术。

电解质分析仪将组装在一起的钾、钠、氯等测量电极，与银/氯化银等参比电极相连接后放置于待测的电解质溶液之中，这样就形成了一个测量电池。标本中钾、钠、氯离子浓度的改变会导致测量电池电位的变化。

根据能斯特（Nernst）方程（电位的变化与离子活度的对数存在一定的关系）就可以求出待测标本中钾、钠、氯离子浓度。我们正常人血浆可以分为固相和液相，固相中的固体物质部分主要是蛋白质和血脂，大约占到总体血浆的7％，而水相大约占93%，然而电解质都存在于水相之中。离子选择电极只会对水相中活化的离子产生选择性响应，而不会与固相中的蛋白质和脂肪产生响应。

ISE法根据样品是否被稀释又分为“直接ISE”法“和间接ISE法”。

直接法是血液样品直接送达检测部位测量。间接法是样品在送到电极测量部位之前先被吸引到测量室中和高离子强度的稀释液进行高比例稀释。一般附有一次性ISE电极的自动分析仪和大多数电解质分析仪都采用直接ISE方法。全自动生化分析仪的ISE部分则以间接法为主。本实验室采用的间接ISE法。

那脂血是如何影响间接ISE的检测呢？

一、“挤压”作用

假如我们人为的把正常情况下的血浆看做100份，其中水相只占到93份，电解质只是溶解在这93份的水相当中，而高脂血症中的固相成分远远大于正常血清中的固相成分，“挤占”了水相比例，产生“占位”效应。从而使测得结果偏低。

二、电解质排斥相应

使用间接电极选择法测定电解质，重度脂血标本经过离子强度缓冲溶液稀释再测量，会较大程度地改变水相与非水相的比例，使得结果有偏差。

如何理解电解质排斥效应呢?

从上图中可知，在血浆中水相容量保持恒定这一前提下，ISE间接法将测定结果最后在乘以系数107.45才会得到最终结果。但是当血浆水含量改变（比如固相成分增加或者是减少）,标本被稀释后，再将所测定结果乘以系数107.45，导致结果发生改变。

比如一患者1mL血浆中含有930ul水及70ul固体，水中钠离子为150mmol/L.采用间接ISE法，标本被稀释100倍

100倍稀释的水稀释比为：(990 + 9.3)/ 9.3 = 107.45

钠浓度测得值为：150/107.45=1.402mmol/L

计算后为：1.402*水稀释比（即107.45）=150mmol/L

假如该患者mL血浆中含有800ul水及200ul固体，水中钠离子为150mmol/L。

采用间接ISE法，标本被稀释100倍。

100倍稀释的水实际稀释比为：(990 +8)/ 8 = 124.75

钠浓度测得值为：150/124.75=1.202mmol/L

计算后为：1.202*理论上稀释比（即107.45）=129.15mmol/L

案例总结

目前临床检验中对于离子的检测的方法主要有离子选择电极法（ISE法）、火焰光度法、酶法等。ISE又可分直接法和间接法。正是由于间接电极法（ISE）简便、灵敏，特备适合大型自动生化分析仪使用，所以目前绝大多数实验室都已普遍使用该法进行离子测定。

本实验室同样采取的是间接ISE法。然而间接ISE法最大的缺陷就是电解质排斥效应（没有考虑水相在真实体液中的比例）导致结果偏低。如果采用直接ISE（比如血气分析仪）就不会有电解质排斥效应。

高脂血症和高蛋白血症等固相物质增加的疾病（如图5）对间接ISE离子的测定有干扰，所以遇到这种标本时可以采用直接ISE来测定其浓度。

图5 容易导致固相成分增加的疾病

专家点评

朱一堂 沧州市中心医院检验科主任 主任技师 硕士研究生导师

生化中离子的检测作为检验科的常规检测项目，可为很多疾病的早期诊断以及疾病的评估提供依据。由于实验方法的局限性以及患者疾病的影响，很多项目的检测并不能反映患者体内的真实水平。这时作为我们检验人一定要从实际出发，排除方法学以及疾病等因素的影响，寻求患者血液成分真实含量的真相。

【参考文献】

[1]周新，涂植光.临床生物化学和生物化学检验[M].第3版.北京:人民卫生出版社，2003;116-119,124,496-497,507-508

[2].倪莉,方茂,朱丽丹,等.重度脂浊对间接离子选择电极法测定血清钠钾氯的干扰[J].温州医科大学学报, 2019, 49(11): 802-806

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编辑：徐少卿 审校：陈雪礼