肿瘤标志物升高近百倍！检验人务必警惕这个干扰因素

*仅供医学专业人士阅读参考

如何去除干扰影响、发放检验报告？

作者丨邵方桂 王瑜敏 吴锐浩

案例信息

2023年6月，我们在临床免疫检验工作中遇到这样一个案例：一位30岁女性健康体检患者的CA199、CA125分别为3061.5U/ml（正常范围为0-37U/ml）和212.2U/ml（正常范围为0-35U/ml），其余肿瘤标志物AFP、CEA和CA153等均在正常范围内。

CA199升高多见于胰腺癌、肠癌、肝癌等消化道肿瘤，部分肺癌、卵巢癌和肝胆、胰腺或消化系统的良性病变也会出现CA199升高。

CA125升高主要见于卵巢恶性肿瘤、乳腺癌、胰腺癌、胃癌、肺癌、肠癌及其他良性卵巢疾病等，同时在妊娠早期或者月经周期等生理情况下也可能会升高。

该年轻女性患者CA125升高首先应考虑可能与患者月经周期等生理情况相关；CA199如此之高，需要考虑患者是否存在消化道肿瘤。

我们随即查询了该患者当天的影像学检查结果，发现该患者除有右侧甲状腺结节TI-RADS 3类、右侧乳腺结节BI-RADS 3类外，肝胆胰、子宫及两侧附件、胸部CT等均无异常。根据影像学结果，患者存在肿瘤的可能性非常小。那到底是什么原因导致的CA199异常升高呢?

在排除样本混淆和检测系统误差等问题后，我们将异常结果进行复查，发现结果一致。根据过往的经验，我们怀疑CA199异常升高可能是异嗜性抗体的干扰，于是立即在其他平台进行检测，同时运用异嗜性抗体阻断剂进行阻断。发现另一平台的CA199检测结果为43.2U/ml；而通过阻断剂进行阻断后，当前平台的检测结果也降至61.6U/ml。因此我们认为该患者CA199的异常升高为异嗜性抗体干扰所致，而患者本身的CA199水平可能仅为轻度升高。于是我们将阻断后的CA199结果报告给临床，并备注“CA199疑异嗜性抗体干扰，此为阻断后复核结果。CA125结果已复测”。

一周后，患者出于对自身健康的担忧，再次来院抽血复查，并追加了ProGRP（胃泌素释放肽前体）项目。此次复查的结果为CA199、CA125和ProGRP均异常升高，分别为CA199 2700U/ml、CA125 99.9U/ml、ProGRP 491.7pg/ml（正常范围为0-55pg/ml）。其余肿瘤标志物AFP、CEA和CA153等仍在正常范围。

ProGRP（胃泌素释放肽前体）是一种由胃泌素释放钛基因编码的前体蛋白质，异常升高通常见于小细胞肺癌患者。

通过之前的结果，我们知道CA199异常升高是由异嗜性抗体干扰所致，而此次CA125依然高，ProGRP也高出正常值将近9倍，究竟是什么原因导致的这两项肿瘤标志物也异常升高呢？

案例分析

▎异嗜性抗体干扰造成CA199异常升高

我们首先排除样本混淆和检测系统误差问题，即刻从流水线调取样本进行核对，样本信息无误，样本无溶血、黄疸及脂浊等，基本排除了样本性状对检测结果的干扰。对该标本再次复查CA199和CA125，与初次检测结果一致。

此外，回顾室内质控，CA199和CA125多个模块质控均在控，且CV均在5%之内。仪器的日保养、周保养日志均在75分以上，仪器的加样系统、清洗系统及温控系统均未发现有异常，故检测系统处于正常工作状态。

排查不同平台导致的差异，通过化学发光法平台检测血样中的CA199水平，结果为轻度升高（43.2U/ml），两个平台结果差异较大（CA125暂时无法通过其他平台进行验证）。

分析其余肿瘤标志物检测项目的质控结果，对当日CEA、AFP及CA153室内质控数据进行回顾分析，结果显示这几个项目不同浓度水平的质控结果均在控，CV均小于5%。此外，复测的CEA、AFP、CA153检测结果同前，均在正常参考范围内。

干扰物质的可能性：临床免疫学检测的常规内源性干扰物质有类风湿因子、自身抗体、补体、异嗜性抗体等。我们检测了类风湿因子、自身抗体、补体，其中类风湿因子和补体的结果均为正常，抗核抗体和ENA抗体均为阴性，故考虑是否存在异嗜性抗体的可能。

异嗜性抗体通常是指与其他种类动物的免疫球蛋白产生反应的人类抗体。临床采用鼠源性CD3等单克隆抗体治疗，用放射性同位素标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等新技术，均有可能使这些病人体内产生抗鼠源性抗体，即异嗜性抗体。

而我们的免疫检测系统中大都使用单克隆抗体，异嗜性抗体可与啮齿类动物IgG的Fc段结合，这样异嗜性抗体既可与检测系统中的捕获抗体结合，又可和标记抗体结合，造成检测结果假阳性或假性升高。

通常，去除异嗜性抗体干扰的方法有以下几种：

• 稀释法

如果样本的异嗜性抗体浓度含量不是很高，且它所造成的干扰不是很大时，可以采用稀释法减少它的干扰，但不能够完全消除。

• 物理化学法

可通过超速离心、凝胶过滤或色谱、三氯乙酸沉淀、聚乙二醇（PEG）、巯基抗原和清洁剂来消除Ig片段，降低干扰。

• 阻断法

利用非特异性和特异性阻断剂与异嗜性抗体结合，从而减少或消除干扰。

• 利用与异嗜性抗体低反应性的物质

可使用非Ig亲和蛋白、特异性兔F（ab）片段作为固相或测定酶标抗体，从而降低与异嗜性抗体的结合。

• 更换检测系统

利用不同厂家生产的单克隆抗体间存在的差异，减少异嗜性抗体的干扰。

故我们用商品化的异嗜性抗体的HIER-E-001阻断剂进行处理，再对CA199在该平台进行复检。结果如下：

因此我们认为该患者CA199的异常升高为异嗜性抗体干扰所致，而患者自身可能存在CA199的轻度升高，于是我们将阻断后的CA199结果报告给临床。

▎异嗜性抗体造成多项肿瘤标志物同时升高

患者第二次抽血复查，CA199、CA125和ProGRP等多项肿瘤标志物异常升高。根据之前的结果，我们已经知道CA199的异常升高为异嗜性抗体干扰所致，那么其余肿瘤标志物的异常升高是否也可能是异嗜性抗体造成的？

带着疑问，我们查阅了相关文献，发现异嗜性抗体除可以导致CA199显著升高外，其余肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1及CA125等也有过异嗜性抗体造成假性升高的报道。

于是我们增加了异嗜性抗体阻断剂的种类，对异常升高的肿瘤标志物进行阻断后再分别进行检测。结果如下：

高浓度HIER-E-001和HIER-E-014处理后，结果明显下降，而HIER-E-010-D处理后效果不显著，即该患者CA125（正常范围为0-35U/ml）和ProGRP（正常范围为0-55pg/ml）的结果在正常范围内，CA199水平轻度升高（正常范围为0-37U/ml），故该患者血样中存在高水平HIER-E-001及HIER-E-014对应类型的异嗜性抗体，引起该检测平台干扰，而造成多种肿瘤标志物的异常升高。

案例启示与思考

▎为什么不同检测平台的结果不一致？

由于目前肿瘤标志物的国际标准化尚未统一，不同医院使用不同平台、不同方法、不同试剂检测同一项标志物时，其结果可能出现差异。试剂采用不同的抗体标记、不同的定标液、不同抗干扰能力、分析仪器选择性差异等都会导致检测结果的差异。所以不同医院或者不同平台的检测结果往往缺乏可比性，需要长期随访监测肿瘤标志物的患者，建议尽量选择同一家医院或同一个临床实验室，若同一家医院存在两个检测系统，应该选择同一检测系统，以便医生更准确地做出判断。

该案例中不同平台的CA199结果差异较大，可能由于异嗜性抗体种类繁多，目前不同厂家的试剂盒中针对异嗜性抗体类型的覆盖范围有差异。

▎加强分析后的质量控制管理

临床免疫学检验的质量控制包括分析前、中、后的质量控制，其中分析后的质量控制包括检验结果的审核和发放、临床沟通等。检验报告单审核时，如遇到异常值，需要综合临床资料、历史结果比对、患者临床状态、用药情况等相关信息，确认无误后才能发放报告单。

▎重视异嗜性抗体对临床免疫学检验项目的影响

异嗜性抗体导致临床免疫学检验项目结果假性升高，会对疾病的诊断、治疗、临床医生的决策等产生误导作用。

在临床中如果存在检测结果与临床表现、临床资料及临床诊断不符；与其他相关检测项目结果不一致；与历史检测结果相差甚远且无法解释；与其他方法平台结果有明显差异等情况，应该考虑存在异嗜性抗体干扰的影响。

如果考虑患者存在异嗜性抗体干扰时，可针对性了解患者的自身情况，自身免疫性疾病患者或慢性患者，近期有免疫接种、输血或者接受单克隆抗体治疗的患者，兽医以及与动物接触密切的患者存在异嗜性抗体的可能性较高。

在临床上遇到一些疑似存在异嗜性抗体的样本时，可采用商品化异嗜性抗体阻断剂或稀释后来判断，也可通过其他方法或者平台进行复检，此外还应该注意该异嗜性抗体是否对其他采用免疫学方法检测的检验项目存在干扰。

总结

由于抗原-抗体相互作用的复杂性，免疫学分析结果容易受到干扰。在日常工作中，需要对所使用的检测方法和试剂的特性，特别是可能影响的干扰因素进行详细的了解。当怀疑存在内源性抗体干扰时，可通过梯度稀释、更换检测系统或使用阻断试剂等方法进行确认。

异嗜性抗体引起肿瘤标志物假性升高的案例已有较多报道，其中以CA199最为常见（近期我们已经发现30位患者存在异嗜性抗体，从而导致CA199假性升高的案例，有效避免了内源性抗体干扰引起的错误结果）。但多项肿瘤标志物同时假性升高的情况较为少见。

本例患者在初次检测时除了CA199显著升高外，还伴有ProGRP和CA125升高，其余肿瘤标志物（AFP、CEA和CA153）均在正常范围内。因此，当怀疑患者存在异嗜性抗体时，还应该特别注意该异嗜性抗体是否对其他采用该免疫学方法检测的检验项目存在干扰的可能性。

异嗜性抗体对很多不同结合位点都有较强的亲和力，因此到目前为止还没有一种方法可以彻底消除异嗜性抗体的干扰。当出现检验结果与临床不符的情况时，我们应及时与临床联系和沟通，并运用多种检验技术和方法寻找干扰原因以获得真实的结果，避免造成临床医生的困惑和患者的担忧。故建立完善的异嗜性抗体监测流程对肿瘤标志物的结果报告非常重要，我们构建了异嗜性抗体患者名单库，以备患者下次检查时立即使用阻断剂进行干预，为患者出具快速和准确的肿瘤标志物检验报告单。

参考文献

[1] Serei VD, Marshall I, Carayannopoulos MO. Heterophile antibody interference affecting multiple Roche immunoassays: A case study. Clin Chim Acta. 2019 Oct; 497:125-129.

[2] Abe M, Matsuura T, Hyoki M, et al. Examination of the patient serum presenting a CEA false high value after cancer immuno-cell therapy. Rinsho Byori. 2011 Aug;59(8):763-9.

[3] 汪怀周, 贺铮雯, 鲁琼, 等. 异嗜性抗体干扰引起血清多项肿瘤标志物显著升高1例[J]. 检验医学,2019,34(11):1054-1056.

[4] 韦维. 异嗜性抗体在免疫测定中干扰的研究进展[J]. 国际检验医学杂志,2010,31(10):1123-1126.

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本文来源丨检验医学网

责任编辑丨舒豪

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