一文掌握，脓液该如何送检细菌培养？

来源：检验星空

临床经常会有一些病人，伤口出现脓液，通过临床即可诊断为感染，但对脓液送检微生物培养后却发现是无菌生长，那么微生物室应该怎么向临床解释培养结果？出现临床症状与实验室结果不符合的原因是什么？

脓液是什么？

脓液是机体局部炎症组织坏死的溶解产物。在炎症过程中,由于局部血液循环严重障碍及病原菌的内、外毒素作用等,可发生局部组织营养不良及变性,最后导致坏死。坏死组织在细菌毒素及死亡的白细胞释放出的蛋白酶作用下,水解化为脓液。因此脓液中主要由组织分解产物、炎症渗出物、白细胞及死亡的细菌等组成。

微生物生长需要的条件？

人工培养细菌需要提供充足的营养物质使细菌获得生长繁殖所需要的原料和能量，除此之外尚要有适宜的环境条件，如酸碱度、渗透压、温度和必要的气体等。

营养物质：

1、水：细菌所需营养物质必须先溶于水，营养的吸收和代谢均需有水才能进行。

2、碳源：病原菌主要从糖类获得碳，作为合成菌体组分和获得能量的主要来源。

3、氮源：主要功能是作为菌体成分的原料，主要从氨基酸、蛋白胨等有机氮化物获得。

4、无机盐：构成有机化合物，成为菌体的成分；作为酶的组成部分，维持酶的活性；参与能量的储存和转运；调节菌体内外的渗透压。

多数细菌在代谢过程中需要 CO2，但分解糖类时产生的 CO2 已足够其所需，且空气中还有微量 CO2，不必额外补充，只有少数菌如布鲁菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等必须在 5%-10%CO2 环境中才能生长。

脓液是否满足微生物生长要求？

答案显然是否定的，脓液的成份不能满足微生物生长所需的营养物质要求，如果再没有及时进行送检，阳性结果率很低。

如何采集脓性分泌物才能满足细菌培养要求呢？

1、首先，任何标本都应在应用抗生素之前进行采样；采样前可用无菌生理盐水清洗病灶表面的污染杂菌，采集后立即送检。

2、对已破溃脓肿一般以无菌棉拭采取病灶深部的分泌物，置入无菌试管中送检；对未破溃的脓肿可严格消毒后，以无菌注射器抽取脓汁，也可切开排脓用无菌棉拭子采取深部的分泌物。

3、对瘘管的标本，常用无菌棉拭子挤压，选取脓汁中“硫磺样颗粒”[注]，置于无菌管中送检。

4、如有恶臭等怀疑厌氧菌感染时，标本采集后应在 30 分钟内送检。[注]硫磺样颗粒：在患者病灶组织和瘘管中流出的脓汁中，肉眼可见的由放线菌在组织中形成的黄色小颗粒状菌落。

脓液和创伤分泌物标本的采集及运送

检验项目：脓汁和创面分泌物的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。

物品准备与检验申请

1、领取无菌试管或无菌拭子。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。

2、填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。

标本采集

采集指征

1、症状指征：①局部症状：红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。但随病程迟早、病变范围、位置深浅，五个症状不一定全部表现。病变范围小或位置较深时，局部症状可不明显。②全身症状：轻重不一。感染较重者常有发热、头痛、全身不适、乏力食欲减退等，一般均有白细胞计数增加和核左移。病程较长时，可有水和电解质紊乱，血浆蛋白减少，肝糖原大量消耗，可出现营养不良、贫血、水肿等症状。全身性感染严重的病人可发生感染性休克。

2、 疾病指征：①软组织的急性化脓性炎症：如疖、痈、急性蜂窝织炎、丹毒等。②化脓性疾病：如甲沟炎、化脓性关节炎、化脓性骨髓炎、气性坏疽、细菌性结膜炎、鼻窦炎、化脓性扁桃体炎、急性化脓性中耳炎、急性化脓性乳突炎、急性乳房炎、急性胆囊炎、急性梗阻性化脓性胆管炎、心包炎、结核性腹膜炎。③脓肿：扁桃体脓肿、咽部脓肿、咽旁脓肿、脑脓肿、肺脓肿、肝脓肿、脓胸、腹腔脓肿、肾皮质化脓性感染、肾周围炎和肾周脓肿、直肠肛管周围脓肿。④创伤感染：术后切口感染、导管感染、脐带残端感染。

采集方法

1、开放脓肿用无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用蘸有无菌生理盐水的灭菌拭子采取脓液和病灶深部的分泌物，置无菌试管内送检。注意尽量取化脓组织与正常组织交界处的脓汁，因为脓汁中心的细菌大部分已死亡，交界处的活菌较多，会提高阳性率。

2、 闭锁脓肿一般采用穿刺或手术引流的方法采取。采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤后，用无菌注射器抽取脓液送检；也可于切开排脓时用无菌棉拭子采样。

3、 烧伤伤口 先清创，出现渗出物后用拭子用力采集病灶基底部或边缘的标本。也可送组织标本。

4、脓疱或水疱 用酒精进行表面消毒，待消毒液干燥，用针头（小儿用23号针头）挑破脓疱，用拭子采集脓疱液和基底部标本。

5、 注意事项：①采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂，应在用药之前采取。②对大多数开放伤口，采集前应先清创，去除表面菌群。③除非有渗出物，干燥、结痂伤口取材一般不做培养。④闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本，不能用拭子采集。开放脓肿处理同开放伤口。⑤不要仅仅送检脓液，应在病灶活动区域或基底部采集标本，最好是组织标本。

标本运送和验收

1、 标本采集后应尽快送检，如果在 1h 内不能培养，应将标本 4℃ 冷藏（培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌的标本除外）

2、 送检地点：检验科细菌室或急诊检验科

3、标本验收与拒收:

①检查盛装标本的容器是否符合无菌要求，是否有渗漏、破裂或明显污染；

②检查盛装标本的容器标签与申请单是否相符，送检目的不要只写“伤口”应注明解剖来源及来自闭合伤口还是开放伤口；

③检查标本是否适量，是否及时送检。送检时间过长者应拒收。

④标本涂片革兰染色若发现上皮细胞，提示标本已被污染，一般不适合再做培养。

参考文献：[1]李凡,刘晶晶.医学微生物学[M].北京.人民卫生出版社,2010:150-153