“大师兄,为什么我的培养瓶中,显微镜观察,怎么有那么多小黑虫,好恶心啊!”
本来怀疑是支原体污染。于是检测了一下,果真是的,就买了支原体清除剂。别说效果还真好,3天后细胞状态就好了。
既然细胞状态好了,就停用了,没想到一停用,细胞状态就又差了。
相信很多小伙伴,在实验中也遇到类似的情况,这其实是“黑胶虫”现象 ,简单来说,就是买到了劣质血清或假血清。
图片来源:站酷海洛
如何准确辨别,劣质或假血清?
一、看外观
1、颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,优质的血清,质量的呈现出淡黄、微红色,如Gibco 16000,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
2、沉淀很多血清客户,会发现血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。 购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
3、澄清度优质胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡
二、看主要技术指标
1、内毒素标准为不高于5EU/ml 。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高。内毒素含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。
2、总蛋白含量胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。
3、血红蛋白标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。
4、pH优质胎牛血清,大多低于7.5
5、微生物包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。一般细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,大肠杆菌噬菌体的污染可能会有出现,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,是优质胎牛血清的一项重要指标。
6、免疫球蛋白优质的胎牛血清,一般不含IgM,IgG的含量也较低。
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