蛭弧菌是寄生在某些细菌并导致其裂解的一类细菌,最早是由德国的Stolp在土壤中发现的。蛭弧菌的生物学名称为噬菌蛭弧菌。蛭弧菌是一类专门捕食细菌的寄生性细菌,具有独特的裂解细菌的生物学特性,能够在较短的时间内裂解水体中的沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shiglla)、埃希氏菌属(Escherichia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、欧文氏菌属(Erwina)、弧菌属(Vibri)等属的种类,可将致病菌限制在较低水平上,同时,还可有效地控制养殖水体的COD、硫化物和氨氮存留量。
蛭弧菌的形态特征
蛭弧菌具有一般细菌的特性,较一般细菌小,能通过过滤器,有类似噬菌体 的作用。革兰氏染色阴性,单细胞,呈弧状或杆状,大小为(0.3-0.6)微米×(0.8-1.2)微米,或仅为杆菌长度的1/3-1/4。胞浆中常可观察到致密小体,长约150nm~300nm,宽为 70nm-120nm,呈片状结构。核区非常明显,周围包绕着数个核糖体颗粒。在蛭弧菌中还可以见到间体及其他许多内 含物质,端生鞭毛,多为1根;有的在 另一端生有一束纤毛。水生蛭弧菌的鞭 毛还具有鞘膜,是细胞壁的延伸物,并乌黑有鞭毛丝状体,故比其它细菌的鞭毛粗3-4倍。蛭弧菌的鞭毛基部没有类似于其它革兰氏阴性鞭毛基部所具有的L环结构。细胞中蛋白质量可占干重的 60%-65%,DNA含量5%,从自然界分 离的都呈依赖寄生型,与宿主细胞间常 表现出一定的特异性,但有的特异性较 差,能侵入多种细菌。
普遍证实蛭弧菌在适宜宿主上形成噬菌斑的pH值为5.5-9.0,最适pH值为 7-8。蛭弧菌对热敏感,50℃以上时,30分钟失去活性;40℃时30分钟活性减 少一半;在4℃-37℃条件下都有可生 长,最适生长温度为25℃-30℃,为一类嗜中温性细菌。蛭弧菌在死菌中形成噬菌斑数是活菌的35-290倍。
蛭弧茵的生活周期与生活史
国外学者对蛭弧菌的生活周期作了大量研究工作,尤其是近几年又从微观水平上对蛭弧菌的生活周期开展了大量研究工作,Nunez等人利用原子力 显微镜观察研究了蛭弧菌109J的生活周 期;Rendulic等人从基因水平上对蛭弧 菌的生活周期进行了研究;Beck、Barel 等人研究发表了蛭弧菌宿主体内增长时 产生蛋白等。Thomashow等提出了“蛭 弧菌的穿入、稳定、裂解”模型,既首先蛭弧菌通过化学趋避性识别,并吸附宿主细菌,然后通过酶解和机械钻孔等一系列反应,进入宿主细菌的质壁空间或细胞质,对宿主细胞进行一系列的修饰与改造,同时进行自身生物大分子合成,最终分裂形成子代蛭弧菌并释放到宿主细胞外。
蛭弧菌为细胞内寄生物,整个生活周期可分为识别、侵入、穿入宿主菌 体、生长发育、裂解宿主、释放子代蛭弧菌。蛭弧菌的生长过程可分为两个时 期:具有1根有外鞘的极生鞭毛和高度的运动性的攻击期扩鞭毛脱落,不具有运动性的生长周期。攻击期时,其与宿 主菌激烈碰撞,以没有鞭毛的一端直接吸附到宿主细菌上,菌体转动速度超过 200r/s,在此之后,鞭毛脱落,然后释放出多种酶以穿透宿主细胞壁的小孔右进入到细胞内,和细胞膜之间或直接进入细胞间质中。侵入过程仅几秒钟。穿入宿主菌后,鞭毛消失,整个过程最长为60分钟。宿主菌则因渗透压改变而涨大成圆球状,且立即死亡,成为蛭弧菌的生长空间。它利用宿主的原生质为养分生长,经过一定时间后,宿主营养被完全吸收,长螺旋状的菌体均等二分裂 出许多带鞭毛的子代,它们可以重新浸染宿主,开始下一个循环过程。完成这一增殖的全过程约需4-6小时。在饥饿等特殊情况下,蛭弧菌会进入囊体周期。
蛭弧茵的生态学特点
蛭弧菌在自然界的分布较广,其含量通常在夏季较高,而在冬季较低。土 壤、植物根系、河水、海水、湖水、井水及下水道污水中都有蛭弧菌的分布, 并能从陆生动物、水生动物或人的粪便中分离到蛭弧菌。但在清洁的自来水、泉水中很难检出。水生蛭弧菌属倾向于表面生长,是生物膜的重要组成成分。
蛭弧茵的保藏
蛭弧菌的保藏关系到其规模化生产和应用。国外的研究表明,用含宿主细 胞的YP培养基保藏蛭弧菌,在4~8个月内仍有一定活性。国内的研究表明,在 4℃条件下,用自来水宿主软琼脂保藏 时,至少可存活3个月以上;黄文等人用4。C甘油、4℃NB液、平板、-20℃甘 油和冷冻干燥等5种方法保蒇蛭弧菌, 发现冷冻干燥法最好,21个月的复洗率达100%,且复活后的形状和噬菌特性不 变;其次为一20+(2甘油NB液保存法,17全月的复活率为67%;其它方法的保存 时间也平均超过3个月。
蛭弧茵的噬菌条件
大量研究表明,蛭弧菌对pH、 温度等环境因子的要求并不严格。邵桂元等人作了鱼病蛭弧菌的微生态学初步研究,发现蛭弧菌Bds一4等菌株 在4℃~37℃和pH6.0~8.0的条件下, 对点状产气单胞菌有形成噬菌斑的能力。李戈强等人经研究指出,蛭弧菌在温度10X2~35℃和pH6.5~8.1的范围 内,对河流蛭弧菌均有裂解作用;在 25"12~30"(2和pH6.5~8.1时的裂解作用 最强。马志宏等人也经过研究认为蛭弧 菌对环境条件的适应性强,对温度和pH 的适应范围较广。
蛭弧茵的除菌效果
秦生巨等人的研究认为,蛭弧菌在河水中21天后,可使不凝集弧菌由 4.46 X 106个/mL降到27个/mL。杨莉等人的研究结果发现,蛭弧菌对鲤鱼感染嗜水气单胞菌的裂解效果,蛭弧菌在5天后使嗜水气单胞菌的浓度下降了103cfu/mL,9天后下降了107cfu/mL。说明蛭弧菌的除菌效率高。
蛭弧茵的安全性
迄今为止,已有一些报道说蛭弧菌对人和某些动物无害。薛恒平、秦生巨等人曾报道蛭弧菌能够促进仔鸡生长,提高增重率;冯晓英等的研究表明, 在注射0.02mL浓度为8×105pfu/mL的蛭弧菌后,观察72小时,实验小鼠全部存活,无任何病态,生长良好;8yrd等人也认为,蛭弧菌对人无致病性。但蛭弧菌对水产动物的安全性尚未进行更多的研究。
— 蛭弧菌的科研现状 —
(一)国外的研究
自1962年Stolp和Petzlod首次研究蛭弧菌以来,国外学者对蛭弧菌的生态 学和生物学特性等已开展了大量研究。 Shilo等人于1965年就对蛭菌的形态学 展开了研究;其后的Starr等人在蛭弧菌 分子生物特性方面进行了研究;最近的 Lambert、Martin、Nunez、Rendulic等 人在蛭弧菌的裂解机制及其生活周期的 动力学方面取得重大研究进展。 国外学者的主要研究方向有:蛭 弧菌基因及相关蛋白在生活周期中特性与功能,如淀粉酶基因、cya和类crp基 因、MCP基因、丝氨酸蛋白酶和转运蛋 白、外膜蛋白(OMPS);蛭弧菌种间 变异的研究,如外膜蛋白(OMPS)、 脂多糖(LPS)、16sDNA序列、细胞 大小、形状、噬菌斑大小、生长能力、 染色情况、对宿主的敏感性等;借助原 子力显微镜对蛭弧菌109J裂解宿主的动 力学研究;环境因素对蛭弧菌存活周期 的影响,如重金属镉、苯酚、尿素等; 从分子水平对蛭弧菌进行鉴定的研究 PCR引物的设计等。
(二)国内的研究
我国对蛭弧菌的研究起步较晚,但研究进展较快。1979年,我国首次开展了蛭弧菌的研究;研究中发现蛭弧菌对许多动物包括人体和植物的致病菌,如霍乱弧菌、伤寒沙门氏菌、副溶血弧菌、福氏志贺 菌及大肠杆菌、嗜水气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、荧光假单胞菌等均有显 著的裂解作用。中国水产科学研究院黄海水产研究所、中国海洋大学、上海海洋大学、江苏省海洋渔业研究所等单位的研究也证明,蛭弧菌对水产养殖动物中常见的副溶血弧菌、溶藻弧菌等革兰 氏阴性菌的裂解率可达97.33%。
1981年,我国卫生部将“细菌寄生菌一蛭弧菌的研究” (用生物学方法杀灭EIT0r霍乱弧菌)列为重点研究课题,并于1985年取得重大突破,研究成果获卫生部科技进步奖。 1982年,司稚东等人开展了蛭弧菌的系统性研究,在生物学特性、培养 保藏方法、生态学及污水净化等方面取得很多成果;此后大批科研工作者开展了相关研究:如吴承龙等人研究了蛭弧 菌某些生物学特性一形态、对不同宿主菌的裂解活性等;秦生巨、黄文等人研究了蛭弧菌保藏方法一冷冻干燥法、 4。C营养肉汤液保藏法、-20℃甘油保藏 法;赵孝先等人研究了蛭弧菌在细胞匀浆中增殖一大肠杆菌、大豆根瘤菌(灭 活)、枯草芽孢杆菌(灭活)、酵母菌 (灭活)匀浆液培养蛭弧菌,邵桂元等人研究了蛭弧菌最适培养条件、温度、 pH值等;杨淑专、李戈强、马志宏、 杨莉等人分别研究了蛭弧菌对虾类致病 菌~肠型点状气单胞菌、荧光假单胞菌、鳗弧菌等的裂解作用,用注射注解和浸泡感染方式研究蛭弧菌对欧洲鳗细菌性疾病的防治及其水质指标—pH值、 总硬度、浊度、生物耗氧量等。这些研究为蛭弧菌在水产养殖病害防治中的应用奠定了重要理论基础。
蛭弧菌微生物生态制剂最早是1990 年应用于水产养殖方面,由秦生巨等与江苏省微生物研究所合作,将它用于养殖珍珠的三角帆蚌的嗜水气单胞菌病防治上;1991年,又与中国水产科学研究院淡水渔业研究中心合作,将它用于淡水鱼细菌性疾病的防治和养殖水体的改良上;1993年,与上海海洋大学合作,将它用于甲鱼和河鱿鱼细菌性防治和水体改良上;1996年,在上海奉贤等地小 范围地用于南美白对虾养殖细菌病防治和水体改良上,均取得较稳定,较好效 果。
1991年,南京麦克生物工程有限 公司试制成功蛭弧菌微生物生态制剂, 并按国务院((兽药管理条例》的规定进 行了小试、中试及临床试验等一系列试 验。
1994年,农业部批准由南京麦克生 物工程有限公司(江苏巨豹实业有限公司的前身)申报的“蛭弧菌微生物生态制剂”为国家二类新兽药,同时发布了《蛭弧菌微生物生态制剂质量标准》。与此同时,农业部批准蛭弧菌为我国兽 用微生物生态制剂生产用菌株。在国际上,我国是继美国之后第二个批准蛭弧菌为兽用微生物生态制剂生产用菌株的国家。其后又开展了规模化生产技术研 究、应用研究等。
1997~1998年,随着南美白对虾的大 量养殖,蛭弧菌微生物生态制剂开始大范 围应用于水产养殖业。当时有几家专门仿 制蛭弧菌微生物制剂的公司成立。
迄今为止,我国对蛭弧菌的研究所取得的主要成果可概括为以下几点:一 是我国建立了蛭弧菌的研究方法;二是发现了蛭弧菌在加热或氯仿致死的宿主中可迅速、更多地出现噬菌斑的宿主菌中增殖的蛭弧菌仍能感染活的宿主菌, 具有重要理论和实践价值;三是研究证 实蛭弧菌对动物包括人体和植物的致病菌有裂解作用;四是制定了我国动物用 蛭弧菌微生物制剂的制造和检验规程, 建立了动物用蛭弧菌微生物生态制剂国家质量标准等。
但到目前为止,尚有一些问题有待进一步研究。一是蛭弧菌的噬菌机制尚未阐明。二是蛭弧菌生态学研究不够深入。三是蛭弧菌长效稳定的保藏方法不够全面。四是缺乏水体污染物对蛭弧菌影响的研究。五是缺乏蛭弧菌合理使用或测水施用的研究。六是有待研究高效 专一的蛭弧菌及其制剂。七是有待加强蛭弧菌制剂的新剂型等。
蛭弧菌是寄生在某些细菌并导致其裂解的一类细菌,最早是由德国的Stolp在土壤中发现的。蛭弧菌的生物学名称为噬菌蛭弧菌。蛭弧菌是一类专门捕食细菌的寄生性细菌,具有独特的裂解细菌的生物学特性,能够在较短的时间内裂解水体中的沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shiglla)、埃希氏菌属(Escherichia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、欧文氏菌属(Erwina)、弧菌属(Vibri)等属的种类,可将致病菌限制在较低水平上,同时,还可有效地控制养殖水体的COD、硫化物和氨氮存留量。
— 蛭弧菌在水产养殖业的应用前景 —
目前,蛭弧菌已在我国商品化生产,并在水产养殖业中广泛应用。蛭弧菌在水产养殖业中应用前景十分广阔。主要用途有:一是蛭弧菌是我国水产养殖动物病害生物防治的一种新工具,利用蛭弧菌控制和减少池塘中细菌性疾病 发生。二是蛭弧菌是水产养殖水体的生物改良剂,利用蛭弧菌对水体中细菌的裂解作用,去除有害于水产养殖动物的致病菌,降低氨氮含量,改善养殖水体环境,减少鱼病的发生;与光合细菌合用,还有控制养殖水体的COD、硫化物等作用。三是蛭弧菌是细菌性疾病防治的“活性抗生素”,因为蛭弧菌能裂解一些异养细菌,使养殖水体中的水产养殖动物致病菌浓度大大降低,进而降低了细菌性疾病的发生率。
蛭弧菌微生物制剂作为防治养殖动物疾病起效较慢,所以,一般将其作为预防用途效果较好。其效应最佳期:一是在虾、蟹幼体开食时期使用,既可以使蛭弧菌在肠壁附着而起到屏障作用,又可以发送动物消化道环境,促进摄食与生长,增强抗病能力;二是在虾、蟹的快速生长期使用,既能清除环境中的有害细菌,又能消灭动物体内的有害细菌,使虾、蟹健康生长,降低发病率;三是在虾、蟹饵料转换期使用,可以使虾、蟹安全渡过转换期,避免致病菌的侵袭;四是在虾、蟹发病,并经抗生素治疗后使用,可以帮助虾、蟹尽快恢复体质,起到明显的保健作用;五是当虾、蟹处在应激状态时使用,可以起到镇静作用,减少虾、蟹因应激死亡量,特别是能减少台风暴雨对虾、蟹的应激影响。
实践证明,科学使用蛭弧菌微生物制剂,可以起到较好的水产养殖动物疾病防治效果。早期使用能够保持池塘水体处于良好态,维持水体生态相对平衡,提高菌种培育成活率和鱼、虾的生长速度。一旦发病后再施用,效果就会差一些。如果生产早期连续使用3~4次,池水就会相对稳定,基本上没有细菌病的发生。
— 蛭弧菌在水产养殖业的应用 —
目前,国内外关于蛭弧菌在水产养殖业上的应用研究多侧重于对环境水体的净化和水产养殖动物细菌性疾病防治两个方面。
水体净化
秦生巨等人(1991)在自然河水中加入2.6×103cfu/mL噬菌蛭弧菌Bd81,并观察水质的变化情况,在48天的观察期间,水质的温度与细菌总数明显下降,而蛭弧菌的含量增加2~7倍,其它理化指标亦有所改变。王丽娜等人(1994)发现蛭弧菌的含量常滞后于水体污染,并且污染后,蛭弧菌可以在较长时间内维持高水平。这一特性可以指示水体污染的新旧及是否遭到连续污染。余倩等人(1994)对成都市的5条主要河流中的噬菌蛭弧菌进行了调查,发现蛭弧菌普遍存在,且噬菌蛭弧菌的含量与污染程度有关,污染越严重则含量越高。
疾病防治
何义进等人对加入蛭弧菌的试验组与未加入蛭弧菌的对照组进行比较后,发现试验组成活率比对照组高19.4%~15.5%,未发生暴发性细菌性鳗病。
杨莉等人(2000)用不同浓度的蛭弧菌投入于水族箱中,对鲤用浸泡法进行人工感染气单胞菌试验,结果表明,蛭弧菌对嗜水气单胞菌有较强的裂解作用,对水体中氨氮有一定的降解作用,并对鲤鱼感染嗜水气单胞菌所致暴发性出血病有明显的预防作用。
黄冬菊等人(2002)在试验中发现噬菌蛭弧菌对海水中的弧菌有强烈的捕杀清除作用。
陈有长等人(2003)用有益微生物(光合细菌和蛭弧菌混合物)在中华绒螯蟹养殖中发现,试验组比对照组池塘中的细菌总数呈几何数量级下降,氨氮、硫化物含量及COD都明显减少,成活率分别提高了11.3%、13.5%和13.3%,并指出,使用噬菌蛭弧菌的浓度为 10 7cfu/mL和光合细菌的浓度为109cfu/mL均为5mL/m3较为理想。
曾地刚等人(2004)采用噬菌蛭弧菌预防和治疗斑点叉尾鲴细菌性败血病时试验,结果显示,在试验水体中同时加入噬菌蛭弧菌和嗜水气单胞菌,当水体中的噬菌蛭弧菌浓度达到105/mL以上时有预防效果;采用背部肌肉注射嗜水气单胞菌的方法,使斑点叉尾鲴感染,然后在水体中加入噬菌蛭弧菌,结果是试验鱼全部死亡,说明噬菌蛭弧菌不能起到治疗斑点叉尾鲴败血病的作 用。
徐琴等人(2006)将球形红假单胞菌、噬菌蛭弧菌及粘红酵母用于中国对虾幼体培育水体,试验结果表明,与对照组相比,试验组的成活率、变态指数、 体长均匀增长率、酚氧化酶和超氧化物歧化酶活力均优于对照组。试验结束后,试验组比对照组的细菌总数降低了三个数量级,添加噬菌蛭弧菌的组在减少异养菌方面有较好效果。同时用鳗弧菌攻毒,在5天内,对照组的死亡率明显高于试验组,试验组免疫保护率为29.4%~58.5%,以噬菌蛭弧菌和球形红假单胞菌试验组最为显著,使用浓度以2×105cfu/mL为好。
韩韫等人(2005)用从海洋中分离出来的4株蛭弧菌作为生物净化因子,对16株常见海产品潜在的食源性致病弧菌进行裂解试验,发现4株同时使用,可裂解15株弧菌,裂解率高达93.9%。
— 蛭弧菌在水产养殖中的临床应用 —
自1989年江苏无锡地区首次应用蛭弧菌制剂防治育珠三角帆蚌的嗜水气单胞菌开始,到目前为止,蛭弧菌微生物制剂已成为水生动物细菌性疾病防治的主要选择的微生物制剂。经过近20年的发展和研究,我们对蛭弧菌微生物制剂的生态效应和缺陷已有相当了解。
安全性与有效性
安全性评价可分为二个部分:一是安全可靠,二是无毒无害。为确保制产品无毒无害,应每批产品腹部注射小鼠3~4只,每只注射量为0.5mL,观察4天后仍无死亡。如有个别死亡,应将小鼠加倍至6~8只重新试验。如仍有个别死亡,则该批产品应保留15~20天,然后再用10只小鼠试验,如仍有个别死亡,则认为安全性试验不合格。安全试验不合格的产品不能出厂。安全有效性试验用嗜水气单胞菌、副溶血性弧菌、溶藻弧菌等10种以上为宿主菌对所用的蛭弧菌和噬菌体生产的菌株进行效力测定。将宿主菌用适宜的培养基于37。C条件下培养16~18d时,制成悬液,然后用琼脂层叠法检测蛭 弧菌、噬菌体对宿主菌的裂解除能力。制品中的蛭弧菌和噬菌体对上述测定的宿主菌的裂解率在80%以上时方为合格产品。如裂解率低于80%,应重新试验。如重试不合格,则认为该菌株不合格。不合格的菌株不得用于生产。用测定效力的菌株应有80%能上能下为标准菌株。
生态效应
生态效应有生物拮抗效应和防病治病效应等。蛭弧菌是正常微生物群体成员之一,它可以有序定植于动物体内的粘膜或细胞之间,形成生物屏障。这些屏障可以阻止病原微生物的定植,起到竞争位置和争夺营养、共生等生物拮抗作用。服用蛭弧菌制剂后,机体能产生生物防御作用。
蛭弧菌制剂可以显著提高中国对虾幼体的变态率和存活率;用于南美白对虾、南美蓝对虾养殖时,成活率达到99%以上,增产率可达395.60%~382.14%l对嗜水气单胞菌的裂解率在80%以上,可使由人工感染引起的甲鱼、河豚嗜水气单胞败血 症的发病率降低85.5%,死亡率降低93.3%,增重率提高16%;对大菱鲆重症出血病的治愈率为98.7%。对弧菌的裂解率为87.8%,对九孔鲍病原性细菌的裂解率为32.4%~87.5%。
制剂的使用方法
应用蛭弧菌制剂于水产养殖时,可将制剂产品根据水质好坏适量施用,一般为每亩1m水深用量为250mL~1000mL。在水产育苗生产中使用时,在不 改变养殖条件和环境条件的情况下,可在苗种密集的水体中,每立方米水体用量为250mL~500mL,浸浴2小时以上。如水生动物肠炎等肠道疾病症状明显时,可用蛭弧菌制剂拌饵投喂,每100kg饲料中加入500mL~1000mL,搅拌均匀后将饲料晾干投喂。拌入蛭弧菌制剂的饲料禁止在0"C以下或45℃以上条件下存放。
— 对蛭弧菌或其作用的影响因素 —
(一)药物对蛭弧茵生长和吸附的影响
恩诺沙星(Enrofloxacin简称EF),是第三代喹诺酮类药物,已广泛用于我国水产动物细菌性疾病的防治。由于养殖生产者缺乏科学用药知识,在进行水产养殖病害防治用药时,往往超剂量使用恩诺沙星,势必会影响蛭弧菌的生存。为此,曹海鹏等人研究了恩诺沙星对蛭弧菌生长及吸附的影响。研究结果表明,在固体培养条件下,恩诺沙星对蛭弧菌BDF-H16噬菌斑的产生具有抑制作用,而且随着恩诺沙星浓度的升高,抑制作用越大I在液体培养条件下,蛭弧菌BDF-H16的增殖浓度随着恩诺沙星浓度的增高而降低,但10ug/mL恩诺沙星并没有改变蛭弧菌的生长趋势;而当在液体培养基中添加沸石时,蛭弧菌的吸附量随恩诺沙星含量的增加而逐渐降低。
水质因子对蛭弧茵裂解嗜水气单胞菌的影响
上海海洋大学的钱云云和曹海鹏进行了“水质因子对蛭弧菌裂解嗜水气单胞菌的影响”研究,结果如下: 1.温度:在温度为l 5℃~33℃条件下,蛭弧菌BDF-H16对嗜水气单胞菌均能裂解,最适裂解温度为28。C,低温不利于蛭弧菌对嗜水气单胞菌的裂解。 2.pH:在pH5.5~9.0的条件下,蛭弧菌BDF-H16对嗜水气单胞菌均能裂解,裂解活性最高的pH为7.0~7.5,而在pH5.5~6.5和pH8.5~9.0时的裂解活性相对较低。 3.Ca2+:在Ca2+浓度0mmol/L~5.0mmol/L范围内时,对蛭弧菌裂解嗜水气单胞菌具有一定促进作用,以Ca2+浓度为0.5mmol/L时的裂解活性最高,而当浓度达10.0mmol/L时,裂解活性开始下降。 4.Mg2+:当Mg2+离子浓度在0.2mmol/L~2.0mmol/L时,蛭弧菌对裂解除嗜水气单胞菌具有一定促进作用,Mg2+浓度为0.5mmol/L时的裂解活性最高,当Mg2+浓度大于5.0mmol/L时,裂解活性开始降低。 5.NH4+:NH4+浓度对蛭弧菌裂解嗜水气单胞菌具有一定影响,情况是随着NH4+浓度的升高,蛭弧菌BDF-H16对嗜水气单胞菌的裂解活性降低,当NH4+浓度在0.2mg/L时,产斑数目较对照组少23.0%;而当NH4+浓度为0.8mg/L时,产斑数较对照组少64.7%。 NO2-:N02-对蛭弧菌裂解嗜水气单胞菌也有一定影响。当N02-浓度在0.05mg/L~O.30mg/L时,对裂有一定促进作用,其中以浓度为0.30mg/L时的裂解活性最高,产斑数较对照组高1.6倍,但当浓度在0.5mg/L时,裂解 活性开始下降,产斑数目降低为对照组的50.9%。
蛭弧菌对有益微生物的裂解作用
上海海洋大学的张书俊和曹海鹏还进行了蛭弧菌对有益微生物的裂解研究,利用水产养殖上常用的酵母菌、枯草芽孢杆菌、硝化细菌作为宿主,同时以嗜水气单胞菌为对照,除宿主菌为硝化细菌的双层平板没能形成噬菌斑外,其余均有噬菌斑产生,但有益菌相对于嗜水气单胞菌的出斑时间明显落后,说明蛭弧菌对致病菌的裂解能力强。水中裂解实验验证,8天后酵母菌数目 的对数值较起始值下降了0.59,枯草芽孢杆菌数目的对数值下降1.1,而嗜水气单胞菌下降了2.8。说明蛭弧菌致病的能力比非致病菌强,但也能影响水体中的有益菌存在,因此,在筛选水产用蛭弧菌时,应尽量筛选出对 有益菌无裂解作用的菌株,并以此为筛选标准。
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